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生物顯微鏡的使用方法
在日常學(xué)習、工作和生活中，說(shuō)到顯微鏡，大家肯定都不陌生吧，以下是小編幫大家整理的生物顯微鏡的使用方法，歡迎大家分享。
一、生物顯微鏡的使用
�。ㄒ唬┦褂铆h(huán)境與習慣
1、使用環(huán)境
顯微鏡的工作場(chǎng)所應當清潔、干燥、無(wú)震動(dòng)、無(wú)腐蝕性氣體存在。
2、工作習慣
�。�1）臺面和凳子的高度要適當。
�。ǎ玻╃R檢時(shí)，即便用單目顯微鏡，也須兩眼同時(shí)睜開(kāi)，用左眼觀(guān)察。以便右眼繪圖或記錄。如一只眼睜，一只眼閉，眼睛容易疲勞，無(wú)法久看。工作時(shí)間較長(cháng)時(shí)，可兩眼輪流觀(guān)察。
�。ǘ┦褂们暗臏蕚�
1、光學(xué)系統的安裝
對新購或已經(jīng)卸掉光學(xué)系統的顯微鏡，使用前必須先將顯微鏡安裝起來(lái)。安裝時(shí)，為了防止向下掉灰塵，應按照先上后下的順序，即按照目鏡、物鏡、聚光鏡、反射鏡的順序來(lái)安裝。圖10-3-1為顯微鏡的安裝圖。箭頭所示為光學(xué)元件的安裝位置。
安裝物鏡時(shí)，應先將鏡筒升高或載波物臺下降，使轉換器與載物臺之間保持一定的距離。然后，握往物鏡，把它放入轉換器的螺絲口處，先略向反時(shí)針?lè )较蛐D，待物鏡配上絲紋后，再按順時(shí)針?lè )较蛐�，旋至中等程度松緊即可。安裝物鏡時(shí)，應根據物鏡的放大倍數，從小到大順時(shí)針安裝。轉換物鏡時(shí)，不要用手推著(zhù)物鏡旋轉，那樣會(huì )使物鏡的光軸歪斜。最好用手捏著(zhù)轉換器的轉動(dòng)盤(pán)旋轉，或用手扶著(zhù)與物鏡轉換器銜接處的滾花外圓旋轉。
目鏡和物鏡裝好后，再將聚光鏡插入載物臺下面的聚光器支架內。插入的高度應使聚光器升至最高時(shí)，聚光鏡上透鏡的端面稍低于載物臺的平面，以免載玻片與聚光器的鏡頭相碰。然后，將聚光器的固定螺絲旋緊。對非電光源的顯微鏡來(lái)說(shuō)，最后要把反射鏡插入聚光器下面的插孔內。
2、校正光軸
校正光軸的意義在于使物鏡、目鏡、聚光鏡的主光軸和可變光欄的中心點(diǎn)重合在一條直線(xiàn)上。所以又叫做合軸調節或中心調節。如果光軸歪斜，會(huì )使像差增大，分辨率和清晰度都要下降。
檢查方法是將可變光欄開(kāi)至最大，把低倍物鏡旋入光軸，降低鏡筒，使物鏡與載物臺之間的距離小于該物鏡的工作距離（５mm以下）。不放標本，調節反射鏡的角度，使視場(chǎng)最亮；或調節光源燈的亮度，使視場(chǎng)明暗合適。
然后，拔掉目鏡，直接從鏡筒中觀(guān)察。一邊把可變光欄慢慢縮小或打開(kāi)數次，當光欄關(guān)至最小時(shí)，光欄的像（此時(shí)只有一點(diǎn)點(diǎn)）應正好落在物鏡通光孔的中心。當光欄開(kāi)大到一定程度時(shí)，光欄孔的像應正好與物鏡通光孔的黑圈相重合。若符合上述兩個(gè)條件，說(shuō)明它們“合軸”。否則，就需要調整。
目鏡和物鏡都是固定的，無(wú)法進(jìn)行調整。合軸調節主要是調整聚光鏡的位置。有些顯微鏡聚光器支架兩旁有兩個(gè)光軸校正螺絲，調節這兩個(gè)螺絲，即可合軸。另一種聚光器是由框架上三個(gè)相隔120°的螺絲支持住，其中一個(gè)裝有彈簧，可以伸縮；另外兩個(gè)螺絲，可以旋動(dòng)。調整這兩個(gè)螺絲，便可合軸。
顯微鏡的光軸校正好后，如果沒(méi)有拆下聚光器或其它特殊原因，不必經(jīng)常校正。
3、準備好標本
準備好高質(zhì)量的標本備用。
�。ㄈ┓瓷溏R、聚光器的使用方法和對光方法
1、調光
對采用反射鏡的的顯微鏡，一般都使用平面反射鏡去反射太陽(yáng)的散射光。只有在光線(xiàn)不足或窗外有干擾時(shí)，才使用凹面反射鏡。
采用電光源的顯微鏡，將光亮調合適即行。
2、聚光器的用法
�。�1）聚光器高度的調節 一般的聚光鏡，在平行光照射的情況下，其焦點(diǎn)落在它上端透鏡平面中心上方約1.25mm處。當使用高倍鏡或油鏡時(shí)，由于放大率大，鏡像亮度小，需要較強的照明。因此，應把聚光器升至最高，以便使聚光鏡的焦點(diǎn)正好落在標本平面上。但在使用低倍物鏡時(shí)，可將聚光器適當下降。
�。ǎ玻┛勺児鈾诘挠梅� 可變光欄起兩個(gè)作用。一是控制射向標本的光通量；二是改變聚光器的數值孔徑。在這兩個(gè)作用中，后者是主要的。為了使物鏡的分辨率得到充分的利用，從原則上說(shuō)，聚光器的數值孔徑應與物鏡的相同。否則，分辨率或清晰度會(huì )受影響。
3、對光方法
對電光源顯微鏡來(lái)說(shuō)，使用時(shí)，只要將光調節在合適的亮度即行。不需要進(jìn)行對光。但對使用自然光的低檔顯微鏡來(lái)說(shuō)，要想獲得良好的觀(guān)察效果，必須充分利用照明光線(xiàn)。因此，鏡檢之前應先對光。對光時(shí)，將低倍鏡旋入光軸，聚光器適當升高，可變光欄開(kāi)至最大。然后，從目鏡中觀(guān)察，同時(shí)轉動(dòng)反射鏡，直至視場(chǎng)最明亮、清晰為止。如果利用自然光，則盡量躲避窗框和窗外樹(shù)枝的干擾。
�。ㄋ模┪镧R的正確調焦
對光完成后或調節合適光亮后，升高鏡筒或降低載物臺，將標本玻片夾在移動(dòng)器即標本夾上，并將欲檢查的部分移至載物臺通光孔的中央，然后開(kāi)始調焦。
無(wú)論作何種檢查，均應從低倍鏡開(kāi)始。調焦時(shí)，先用粗動(dòng)手輪將鏡筒下降，使低倍鏡的前透鏡與蓋玻片之間的距離略小于該物鏡的工作距離（５mm以下）。為了避免物鏡壓在標本玻片上，可從側面窺視。然后，一邊從目鏡中觀(guān)察視野，一邊利用粗動(dòng)手輪將鏡筒徐徐上升，待初見(jiàn)物像后，改用微動(dòng)手輪作精細調焦，直至物像最清晰為至。低倍物鏡的視場(chǎng)大，有利于觀(guān)察標本的全貌。也可利用移動(dòng)器或縱、橫向調節手輪尋覓所觀(guān)察的目標。如有必要，可將尋得的目標移至視場(chǎng)的中心，為高倍鏡觀(guān)察作好準備。
從低倍物鏡轉換為高倍物鏡時(shí)，如果物鏡是顯微鏡的原配，所用的載玻片、蓋玻片又符合標準，一般都可以進(jìn)行“等高轉換”。即轉換后，只要稍微調節一下微調旋鈕，即可看到清晰的圖像。但油鏡不強求齊焦，最好先將鏡筒升高后再轉換，最后按低倍鏡的調焦方法重新調焦。
使用油鏡的方法如下：先將鏡筒升高，取下標本玻片，稍稍降低聚光器，并在聚光器的鏡頭上滴兩滴香柏油（油中不應有氣泡。如有，可用小木簽除去），再將標本玻片放回原處，把聚光器升高，使載玻片的底面與香柏油接觸。這樣，就完成了聚光鏡的油浸。接著(zhù)，在蓋玻片上滴上1滴香柏油。然后從側面窺視，利用粗調使鏡筒盡量下降，直至油鏡的前透鏡浸沒(méi)在香柏油中（但尚未接觸玻片），這樣，又完成了物鏡的油浸。然后，一邊從目鏡中觀(guān)察，一邊利用微動(dòng)手輪將鏡筒緩緩上升（注意不要擰錯了方向，壓碎蓋玻片），直至視野中出現最清晰的物像為止。
聚光鏡的油浸，還可以采用另一種滴油方法：即不直接把油滴在聚光器的鏡頭上，而是把載玻片翻過(guò)來(lái)，將油滴在載玻片的底面上，然后再翻過(guò)去，對準放置于聚光器上面，再使聚光器上升，來(lái)完成聚光器的油浸。這種方法雖然不那么順手，但比較安全。有些人使用玻璃棒直接與聚光鏡接觸來(lái)涂抹香柏油，這種方法容易劃傷鏡片，不宜采用。
在使用油鏡時(shí)，允許在聚光鏡與標本之間不加香柏油，即聚光鏡上仍以空氣為介質(zhì)，但這會(huì )犧牲物鏡的分辨率。
如用油鏡觀(guān)察后，如又需要轉回高倍物鏡觀(guān)察，應將蓋玻片上的油擦去，以免沾污高倍物鏡。但聚光器上的油可以不擦，只要把光欄適當縮小一點(diǎn)即可。
油鏡使用完畢后，要及時(shí)將香柏油擦拭干凈。鏡頭上可先用干凈的擦鏡紙擦1～２次，把大部分的油擦掉。然后用二甲苯滴濕的擦鏡紙擦兩次，最后用擦鏡紙擦干凈即行。聚光鏡的擦拭方法與此相同。如標本需要保存，玻片上的香柏油可用“拉紙法”擦拭干凈。即將擦鏡紙復蓋在玻片上，在紙上滴上一滴二甲苯，趁濕將紙條平拖著(zhù)往外拉，連續幾次即可擦干凈。
最后指出：在整個(gè)調焦過(guò)程中（尤其是高倍物鏡和油鏡的調焦），每個(gè)動(dòng)作都要緩慢進(jìn)行。否則，物像會(huì )一閃而過(guò)，找不到觀(guān)察的目標。
生物顯微鏡的使用步驟1
(1)顯微鏡的取送：
�、儆沂治甄R臂;
�、谧笫滞戌R座;
�、壑糜谛厍�。
(2)顯微鏡的旋轉：
�、夔R筒朝前，鏡臂朝后;
�、谥糜谟^(guān)察者座位前的桌子上，偏向身體左側，便于左眼向目鏡內觀(guān)察;
�、壑糜谧雷觾葌�，距桌沿5cm左右。
(3)對光：
�、俎D動(dòng)粗準焦螺旋，使鏡筒徐徐上升，然后轉動(dòng)轉換器，使低倍物鏡對準通光孔;
�、谟檬种皋D動(dòng)遮光器(或片狀光圈)，使最大光圈對準通光孔，左眼向目鏡內注視，同時(shí)轉動(dòng)反光鏡，使其朝向光源，使視野內亮度均勻合適。
(4)低倍物鏡的使用：
�、儆檬洲D動(dòng)粗準焦螺旋，使鏡筒徐徐下降，同時(shí)兩眼從側面注視物鏡鏡頭，當物鏡鏡頭與載物臺的'玻片相距2～3mm時(shí)停止。
�、谟米笱巯蚰跨R內注視(注意右眼應該同時(shí)睜著(zhù))，并轉動(dòng)粗準焦螺旋，使鏡筒徐徐上升，直到看清物象為止。如果不清楚，可調節細準焦螺旋，至清楚為止。
(5)高倍物鏡的使用：使用高倍物鏡之前，必須先用低倍物鏡找到觀(guān)察的物象，并調到視野的正中央，然后轉動(dòng)轉換器再換高倍鏡。換用高倍鏡后，視野內亮度變暗，因此一般選用較大的光圈并使用反光鏡的凹面，然后調節細準焦螺旋。觀(guān)看的物體數目變少，但是體積變大。
(6)反光鏡的使用：反光鏡通常與遮光器(或光圈)配合使用，以調節視野內的亮度。反光鏡有*面和凹面。對光時(shí)，如果視野光線(xiàn)太強，則使用反光鏡的*面，如果光線(xiàn)仍舊太強，則同時(shí)使用較小的光圈;反之，如果視野內光線(xiàn)較弱，則使用較大的光圈或使用反光鏡的凹面。
知識點(diǎn)撥：
(1)進(jìn)行顯微鏡對光時(shí)，應轉動(dòng)反光鏡或是光圈，使視野明亮，便于使用高倍鏡觀(guān)察。
(2)制作臨時(shí)裝片時(shí)，如果觀(guān)察的是植物細胞，在載玻片上滴加清水;如果觀(guān)察人的口腔上皮細胞，需要滴加質(zhì)量分數為0.9%的NaCl溶液,高二。
(3)無(wú)論選取動(dòng)物組織細胞還是植物組織細胞，一定要量少，并且要在載玻片上將觀(guān)察材料展開(kāi)，以便于觀(guān)察。
(4)觀(guān)察時(shí)，要遵循先在低倍鏡下觀(guān)察清楚，將物像移至視野中央，再轉換高倍鏡進(jìn)行觀(guān)察的順序。在使用高倍鏡進(jìn)行觀(guān)察時(shí)，不能轉動(dòng)粗準焦螺旋。
生物顯微鏡的使用方法及步驟1
右手握住鏡臂，左手托住鏡座。
把顯微鏡放在實(shí)驗臺上，略偏左(顯微鏡放在距實(shí)驗臺邊緣7厘米左右處)。安裝好目鏡和物鏡。
二、對光
轉動(dòng)轉換器，使低倍物鏡對準通光孔(物鏡的前端與載物臺要保持2厘米的距離)。
把一個(gè)較大的光圈對準通光孔。左眼注視目鏡內(右眼睜開(kāi)，便于以后同時(shí)畫(huà)圖)。轉動(dòng)反光鏡，使光線(xiàn)通過(guò)通光孔反射到鏡筒內。通過(guò)目鏡，可以看到白亮的視野。
三、觀(guān)察
把所要觀(guān)察的玻片標本(也可以用印有“6”字的薄紙片制成)放在載物臺上，用壓片夾壓住，標本要正對通光孔的中心。
轉動(dòng)粗準焦螺旋，使鏡筒緩緩下降，直到物鏡接近玻片標本為止(眼睛看著(zhù)物鏡，以免物鏡碰到玻片標本)。
左眼向目鏡內看，同時(shí)反方向轉動(dòng)粗準焦螺旋，使鏡筒緩緩上升，直到看清物像為止。再略微轉動(dòng)細準焦螺旋，使看到的物像更加清晰。
高倍物鏡的使用：使用高倍物鏡之前，必須先用低倍物鏡找到觀(guān)察的物象，并調到視野的正中央，然后轉動(dòng)轉換器再換高倍鏡。換用高倍鏡后，視野內亮度變暗，因此一般選用較大的光圈并使用反光鏡的凹面，然后調節細準焦螺旋。觀(guān)看的物體數目變少，但是體積變大。
四、整理
實(shí)驗完畢，把顯微鏡的外表擦拭干凈。轉動(dòng)轉換器，把兩個(gè)物鏡偏到兩旁，并將鏡筒緩緩下降到zui低處，反光鏡豎直放置。最后把顯微鏡放進(jìn)鏡箱里，送回原處。
《注意事項》：
1、嚴忌單手提取顯微鏡。
2、若須移動(dòng)顯微鏡，務(wù)必將顯微鏡提起再放至適當位置，嚴忌推動(dòng)顯微鏡(推動(dòng)時(shí)造成的震動(dòng)可能會(huì )導致顯微鏡內部零件的松動(dòng)，切記!!)，使用顯微鏡請務(wù)必小心輕放。
3、使用顯微鏡時(shí)坐椅的高度應適當，觀(guān)察時(shí)更應習慣兩眼同時(shí)觀(guān)察，且光圈及光源亮度皆應適當，否則長(cháng)時(shí)間觀(guān)察時(shí)極易感覺(jué)疲勞。
4、轉動(dòng)旋轉盤(pán)時(shí)務(wù)必將載物臺降至zui低點(diǎn)，以免因操作不當而刮傷接目鏡之鏡頭。
5、標本染色或其它任何操作皆應將玻片取下，操作完成后再放回載物臺觀(guān)察，切勿在載物臺上操作，以免染劑或其它液體流入顯微鏡內部或傷及鏡頭。
6、觀(guān)察完一種材料，欲更換另一種材料時(shí)，務(wù)必將載物臺下降至zui低點(diǎn)，換好玻片后再依標準程序重新對焦，切勿直接抽換標本，以免刮傷鏡頭或玻片標本。
7、用畢顯微鏡應將載物臺下降至zui低點(diǎn)，并將低倍鏡對準載物臺中央圓孔處，將電源線(xiàn)卷好，蓋上防塵罩，并收入存放柜中。
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