微生物實(shí)驗報告

時(shí)間:2024-01-04 13:55:31 詩(shī)琳 報告范文 我要投稿

微生物實(shí)驗報告(精選7篇)

  在現實(shí)生活中,報告有著(zhù)舉足輕重的地位,報告中提到的所有信息應該是準確無(wú)誤的。那么什么樣的報告才是有效的呢?以下是小編為大家收集的微生物實(shí)驗報告,供大家參考借鑒,希望可以幫助到有需要的朋友。

微生物實(shí)驗報告(精選7篇)

  微生物實(shí)驗報告 1

  實(shí)驗名稱(chēng):

  觀(guān)察洋蔥表皮細胞。

  實(shí)驗目的:

  1、學(xué)習制作洋蔥表皮玻片標本。

  2、學(xué)會(huì )使用顯微鏡觀(guān)察洋蔥表皮,用圖畫(huà)記錄觀(guān)察到的洋蔥表皮細胞。

  3、對比用肉眼、放大鏡、顯微鏡看到的洋蔥表皮各有什么不同。

  實(shí)驗重點(diǎn):

  用顯微鏡觀(guān)察洋蔥表皮細胞。

  實(shí)驗難點(diǎn):

  正確使用顯微鏡。

  實(shí)驗準備:

  分組實(shí)驗器材:顯微鏡、洋蔥、小刀、清水、滴管、吸水紙、載玻片、蓋玻片、鑷子、放大鏡等。實(shí)驗過(guò)程:

  一、導入課題

  出示洋蔥。問(wèn):如果從它的內表皮上揭下一塊,用顯微鏡來(lái)觀(guān)察能看到些什么呢?(板書(shū)課題)

  二、制作洋蔥表皮玻片標本

  1、師講解并演示制作洋蔥表皮玻片標本的方法與步驟。

 。1)在一個(gè)干凈的玻璃載片中間滴一滴清水;

 。2)用小刀在洋蔥鱗葉片內壁劃一個(gè)“井”字,用鑷子取下“井”中洋蔥內表皮放到載玻片的水滴中央,注意標本要平展開(kāi),不能折疊;

 。3)用蓋玻片傾斜著(zhù)蓋到標本上面,放蓋玻片時(shí),先放一端,再慢慢放下另一端,注意不要有氣泡。如水不足,可沿蓋玻片邊緣滴加;若水分過(guò)多,可用吸水紙吸掉;

 。4)從蓋玻片的一邊滴一滴稀釋的碘酒,并把玻片微微傾斜,再在蓋玻片的另一邊用吸水紙吸掉多余的水;

 。5)洋蔥表皮玻片標本做成可進(jìn)行觀(guān)察。

  2、學(xué)生以組為單位自制玻片標本(最好制三份裝片,便于下面的對比觀(guān)察),教師巡視指導(教育學(xué)生注意安全)。

  三、觀(guān)察洋蔥表皮細胞

  1、先用肉眼觀(guān)察洋蔥表皮將看到的'內容畫(huà)在科學(xué)記錄本上。

  2、再用放大鏡觀(guān)察洋蔥表皮將看到的內容畫(huà)到科學(xué)記錄本上。

  3、學(xué)生交流用肉眼和放大鏡分別觀(guān)察到什么?它們有何不同?

  4、利用顯微鏡觀(guān)察洋蔥表皮細胞。

 。1)、出示顯微鏡,引導學(xué)生認識顯微鏡,簡(jiǎn)介各部分的名稱(chēng)、功能及使用方法,學(xué)生每5人一組操作熟悉顯微鏡。

 。2)、各組利用顯微鏡觀(guān)察洋蔥表皮細胞。(師操作演示:安放――對光――上片――調焦――觀(guān)察。生一步步跟著(zhù)操作。)

 。3)、學(xué)生觀(guān)察、記錄、描畫(huà)洋蔥表皮細胞。教師巡視指導,各組的實(shí)驗組長(cháng)監督組員操作是否規范,要求每個(gè)人都要操作、都要觀(guān)察,并將觀(guān)察結果進(jìn)行交流。組長(cháng)將大家在顯微鏡下的發(fā)現畫(huà)到科學(xué)記錄本上。

  5、全班交流在顯微鏡下的發(fā)現。

 。1)各組推薦發(fā)言代表談自己的發(fā)現。

 。2)各組將所畫(huà)的觀(guān)察結果向全班展示。

 。3)交流討論評價(jià)。

  6、師小結:我們發(fā)現放大鏡比肉眼、顯微鏡比放大鏡看到的細節更多,更清楚。我們發(fā)現洋蔥表皮是由一個(gè)個(gè)比較規則的多邊形組成的,而且大多呈長(cháng)方形,外為細胞壁,內為無(wú)色細胞質(zhì)和細胞核。洋蔥表皮上的一個(gè)個(gè)小房間似的結構,就是洋蔥的細胞。(師一邊描述一邊畫(huà)洋蔥細胞簡(jiǎn)圖)

  四、實(shí)驗結束。

  回收實(shí)驗器材,整理實(shí)驗桌。

  微生物實(shí)驗報告 2

  實(shí)驗名稱(chēng):

  用高倍顯微鏡觀(guān)察葉綠體和細胞質(zhì)流動(dòng)

  一、實(shí)驗目的

  1.初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。

  2.觀(guān)察高等植物的葉綠體在細胞質(zhì)基質(zhì)中的形態(tài)和分布

  二、實(shí)驗原理

  高等植物的葉綠體呈橢球狀,在不同的光照條件下,葉綠體可以運動(dòng),改變橢球體的方向,這樣既能接受較多的光照,又不至于被強光灼傷。在強光下,葉綠體以其橢球體的側面朝向光源;在弱光下,葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此,在不同光照條件下采集的葫蘆蘚,其小葉內葉綠體橢球體的形狀不完全一樣;罴毎械募毎|(zhì)處于不斷的流動(dòng)狀態(tài),觀(guān)察細胞質(zhì)的流動(dòng),可以用細胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體的運動(dòng)做為標志。

  三、材料用具

  蘚類(lèi)的.葉,新鮮的黑藻,顯微鏡,載玻片,蓋玻片,滴管,鑷子,刀片,培養皿,鉛筆

  四、實(shí)驗過(guò)程(見(jiàn)書(shū)P30)

  1、制作蘚類(lèi)葉片的臨時(shí)裝片

  2、用顯微鏡觀(guān)察葉綠體

  3、制作黑藻葉片臨時(shí)裝片

  4、用顯微鏡觀(guān)察細胞質(zhì)流動(dòng)

  五、討論

  1、細胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體是否靜止不動(dòng),為什么?

  2、葉綠體的形態(tài)和分布與葉綠體的功能有什么關(guān)系?

  3、植物細胞的細胞質(zhì)處于不斷的流動(dòng)狀態(tài),這對于活細胞完成生命活動(dòng)有什么意義?

  4、用鉛筆畫(huà)一個(gè)葉片細胞,標出葉綠體的大致流動(dòng)方向

  微生物實(shí)驗報告 4

  實(shí)驗目的與要求:

  掌握霉菌與酵母菌的接種與培養方法。

  實(shí)驗原理:

  接種是微生物實(shí)驗及科學(xué)研究中一項基本操作技術(shù)。根據實(shí)驗目的和要求,

  選擇合適的接種工具與接種方法,接種工具有接種環(huán)、接種針、接種鏟、接種鉤、吸管、滴管、棉簽等。常用接種方法有:斜面接種,液體接種,穿刺接種,平板接種和固體接種。接種的關(guān)鍵是無(wú)菌操作。

  無(wú)菌操作的原則:在酒精燈火焰旁進(jìn)行,所有器皿均須嚴格消毒,培養基應事先做無(wú)菌試驗,

  接種工具使用前后須經(jīng)火焰燒灼滅菌,棉塞不能亂放,始終夾在手指中。在培養四大類(lèi)微生物時(shí)應注意選擇適宜的培養條件。多數細菌為專(zhuān)性需氧菌與兼性需氧菌,少數為厭氧菌。多數食品腐敗菌和工業(yè)用菌種,以及人和動(dòng)物病原菌的最適生長(cháng)溫度為37℃,并且在近中性(PH6.5~7.5)條件下生長(cháng)良好。多數放線(xiàn)菌為好氧菌,少數為厭氧菌,最適生長(cháng)溫度為28~30℃,多數適宜在偏堿性環(huán)境中生長(cháng)(PH7.5~8.5)。

  實(shí)驗材料與方法

 。1)實(shí)驗材料:實(shí)驗設備:溫箱。

  實(shí)驗器材:毛霉、曲霉、青霉、根霉、啤酒酵母、白假絲酵母、新生隱球酵母菌、細黃鏈霉菌、PDA平板、高鹽察氏平板、高氏合成I號平板、塑料筐、20%甘油水溶液、鑷子、接種鏟、無(wú)菌蓋玻片、無(wú)菌濾紙、無(wú)菌載玻片、石棉網(wǎng)、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐等。

 。2)實(shí)驗方法:平板接種:毛霉→PDA平板(點(diǎn)植法)

  啤酒酵母→PDA平板(五區分離劃線(xiàn)法)青霉、曲霉→PDA平板(連續劃線(xiàn)法)

  小室載玻片培養法:

  1、取滅菌后小室平皿。

  2、取無(wú)菌PDA瓊脂薄層平板,用鑷子夾住蓋玻片切割成0.5~1.0cm2的瓊脂塊,并將其移至培養小室中的載玻片上,制作過(guò)程注意無(wú)菌。

  3、用接種環(huán)取少量霉菌的孢子接種于培養基四周,用無(wú)菌鑷子

  將蓋玻片覆蓋在瓊脂塊上,并滅菌的`20%甘油(用于保持濕度),蓋上皿蓋,標記,置28~30℃培養3~5d

  糧食產(chǎn)品的平板接種:

  1、取糧食樣品20g,放入無(wú)菌燒杯,加無(wú)菌水洗滌,反復10次,棄去水后,將糧粒倒于平皿內備用

  2、鑷子取糧食種入PDA瓊脂內,每皿可接種5-10粒。

  放線(xiàn)菌的接種:取細黃鏈霉菌劃線(xiàn)法接種,在接種的劃線(xiàn)處,無(wú)菌操作斜插入蓋玻片數張。

  注意事項:

  1.空氣環(huán)境無(wú)菌(應在酒精燈火焰周?chē)鸁o(wú)菌區)

  2.在酒精燈火焰處,傾斜打開(kāi)瓶口。

  3.接種環(huán)使用前,直接在酒精燈上燒灼滅菌,把環(huán)和金屬絲燒紅即可。

  4.接種環(huán)使用后,先在火焰周?chē)循h(huán)上標本烤干,再燒灼滅菌,以免標本汽化,爆烈四濺,污染環(huán)境。5.金屬桿快速通過(guò)火焰2-3次,殺滅表面微生物

  分析與討論

  1、糧食中產(chǎn)毒真菌的種類(lèi)及產(chǎn)生毒素?

  青霉、毛霉、曲霉、根霉、酵母、白念、細黃鏈霉菌(放線(xiàn)菌)青霉素、絲生毛霉素、黃曲霉素、根霉素、白念菌素。細黃鏈菌素

  2、常用霉菌培養基有哪些?

  馬鈴薯蔗糖培養基

  豆芽汁葡萄糖(或蔗糖)瓊脂培養基察氏培養基

  3、霉菌的接種方法有何不同?為什么?

 。1)連續劃線(xiàn)法(青霉、曲霉)

  青霉與曲霉為局限性生長(cháng)的霉菌。應采用連續劃線(xiàn)接種法接種。

 。2)點(diǎn)植法(根霉、毛霉)

  根霉與毛霉生長(cháng)區域比較大,應采用點(diǎn)植法。

 。3)小室載玻片培養法(青霉、毛霉、根霉、曲霉)

  微生物實(shí)驗報告 5

  一、實(shí)驗名稱(chēng):

  用顯微鏡觀(guān)察洋蔥表皮細胞

  二、實(shí)驗材料:

  顯微鏡、洋蔥表皮細胞切片,及其他細胞裝片。

  三、實(shí)驗步驟:

  1、右手握住鏡臂,左手托住鏡座,把顯微鏡向著(zhù)光放在實(shí)驗臺上。

  2、對光:轉動(dòng)轉換器,使低倍物鏡對準通光孔。

  3、調節載物臺下的反光鏡,從目鏡往下看,能看見(jiàn)亮的光圈。

  4、觀(guān)察:調節粗準焦螺旋,把所要觀(guān)察的洋蔥表皮切片放在載物臺上,用壓片夾夾住,標本要正對通光孔的.中央。

  5、左眼向目鏡內看,同時(shí)轉動(dòng)粗準焦螺旋等,直到看清切片上的細胞為止,最后整理器材。

  四、使用注意事項:

  1、取送顯微鏡時(shí),應右手握住鏡臂,左手托住鏡座,輕拿輕放。

  2、鏡檢時(shí),坐姿端正,一般用左眼觀(guān)察物象,用右眼看著(zhù)實(shí)驗報告紙畫(huà)圖。兩眼須同時(shí)睜開(kāi)。

  3、切忌一面從目鏡進(jìn)行觀(guān)察,一面使鏡筒下降,這樣容易使物鏡與玻片標本碰撞而損壞。

  4、在高倍鏡下調節焦距時(shí),切勿使用粗調節器,以免壓壞標本,損壞物鏡。

  5、顯微鏡使用完畢必須先上升鏡筒,移開(kāi)鏡頭后再取出玻片標本,以免取玻片時(shí)擦損鏡頭的鏡面。

  五、實(shí)驗原理:

  利用教學(xué)顯微鏡觀(guān)察洋蔥表皮細胞。

  六、創(chuàng )新點(diǎn):

  在實(shí)驗過(guò)程中為學(xué)生提供多種細胞裝片,以供學(xué)生操作、觀(guān)察,增加了學(xué)生動(dòng)手實(shí)驗的時(shí)間,使學(xué)生在實(shí)驗中經(jīng)歷調節顯微鏡的焦距的過(guò)程,從而熟練掌握教學(xué)教學(xué)顯微鏡的使用方法。

  微生物實(shí)驗報告 6

  一、實(shí)驗名稱(chēng)

  用高倍顯微鏡觀(guān)察葉綠體和細胞質(zhì)流動(dòng)

  二、實(shí)驗目的

  1、初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。

  2、觀(guān)察高等植物的葉綠體在細胞質(zhì)基質(zhì)中的形態(tài)和分布

  三、實(shí)驗原理

  高等植物的葉綠體呈橢球狀,在不同的光照條件下,葉綠體可以運動(dòng),改變橢球體的方向,這樣既能接受較多的`光照,又不至于被強光灼傷。在強光下,葉綠體以其橢球體的側面朝向光源;在弱光下,葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此,在不同光照條件下采集的葫蘆蘚,其小葉內葉綠體橢球體的形狀不完全一樣;罴毎械募毎|(zhì)處于不斷的流動(dòng)狀態(tài),觀(guān)察細胞質(zhì)的流動(dòng),可以用細胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體的運動(dòng)做為標志。

  四、材料用具

  蘚類(lèi)的葉,新鮮的黑藻,顯微鏡,載玻片,蓋玻片,滴管,鑷子,刀片,培養皿,鉛筆

  五、實(shí)驗過(guò)程(見(jiàn)書(shū)p30)

  1、制作蘚類(lèi)葉片的臨時(shí)裝片

  2、用顯微鏡觀(guān)察葉綠體

  3、制作黑藻葉片臨時(shí)裝片

  4、用顯微鏡觀(guān)察細胞質(zhì)流動(dòng)

  六、討論

  1、細胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體是否靜止不動(dòng),為什么?

  2、葉綠體的形態(tài)和分布與葉綠體的功能有什么關(guān)系?

  3、植物細胞的細胞質(zhì)處于不斷的流動(dòng)狀態(tài),這對于活細胞完成生命活動(dòng)有什么意義?

  4、用鉛筆畫(huà)一個(gè)葉片細胞,標出葉綠體的大致流動(dòng)方向。

  微生物實(shí)驗報告 7

  一、實(shí)驗目的

  1、熟悉常用微生物培養基(牛肉膏蛋白胨培養基)的配制方法。

  2、學(xué)習各種無(wú)菌操作技術(shù),并用此技術(shù)進(jìn)行為微生物稀釋分離、劃線(xiàn)分離接種。

  3、用平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板發(fā)分離微生物。

  4、認識為微生物存在的普遍性,體會(huì )無(wú)菌操作的重要性。

  5、掌握分離產(chǎn)淀粉酶微生物的試驗方法和步驟,了解產(chǎn)淀粉酶的微生物種類(lèi)及形態(tài)。

  二、實(shí)驗原理

  土壤是微生物生活的大本營(yíng),是尋找和發(fā)現有重要應用潛力的微生物的主要菌源。不同土樣中各類(lèi)微生物數量不同,一般土壤中細菌數量最多,其次為放線(xiàn)菌和霉菌。一般在較干燥,偏堿性、有機質(zhì)豐富的土壤中放線(xiàn)苗數量較多;酵母菌在一般土壤中的數量較少,而在水果表皮、葡萄園、果園土中數量多些。本次實(shí)驗從土壤中分離產(chǎn)淀粉酶的微生物,應該取那些富含產(chǎn)淀粉酶的微生物的土樣。從復雜的.微生物群體中獲得只含有一種或某一類(lèi)型微生物的過(guò)程稱(chēng)為微生物的分離與純化。常用的方法有

  1、簡(jiǎn)單單細胞挑取法

  2、平板分離法和稀釋涂布平板法

  此次實(shí)驗采取的是平板分離法和稀釋涂布平板法結合,該方法操作簡(jiǎn)單,普遍用于微生物的分離與純化。其原理包括:

  1)稀釋后的細胞懸液圖不在平板上可以分離得單個(gè)菌株

  2)在適合于待分離微生物的生長(cháng)條件(如營(yíng)養、酸堿度、溫度與氧等)下培養微生物,或加入某種抑制劑造成只利于待分離微生物的生長(cháng),而抑制其他微生物生長(cháng)的環(huán)境,從而淘汰一些不需要的微生物。

  3)微生物在固體培養基上生長(cháng)形成的單個(gè)菌落可以是由一個(gè)細胞繁殖而成的集合體。因此可通過(guò)挑取單菌落而獲得純培養。獲得單菌落的方法可通過(guò)稀釋涂布平板或平板劃線(xiàn)等方法完成。

  以淀粉作為惟一碳源的培養基培養未分離細菌,能產(chǎn)淀粉酶的細菌能生長(cháng),且菌落周?chē)霈F透明圈(淀粉不透明,被消化后變透明),則產(chǎn)淀粉酶微生物被分離出來(lái)。本實(shí)驗采用透明圈檢驗法檢測培養物中是否有產(chǎn)淀粉酶微生物的生長(cháng)。

  三、實(shí)驗儀器及試劑

  1、器材:

  培養皿、載玻片、蓋玻片、普通光學(xué)顯微鏡、量筒、滴管、吸水紙、燒杯、三角瓶、酒精燈、玻璃棒、接種環(huán)、鑷子、恒溫培養箱、高壓蒸汽滅菌鍋、天平、濾紙、pH試紙等。

  2、試劑:

  配制牛肉膏蛋白胨培養基的原料(牛肉膏、NaCl、瓊脂、蛋白胨)、淀粉、盧戈氏碘液、蒸餾水、250ml三角瓶中裝90ml無(wú)菌水加20粒玻璃珠,作稀釋用等。

  3、土樣:

  取自貴州大學(xué)農生樓后土壤10g,地下10cm左右。

  四、實(shí)驗步驟:

  1、配制牛肉膏蛋白胨培養基:

  1)配制牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基400ml(用于11個(gè)平皿和7支試管斜面)牛肉膏0.5%…………………………………2g

  蛋白胨1%……………………………………4g

  NaCl0.5%…………………………………..2g

  瓊脂2%……………………………………..8g

  淀粉0.5%........................................2g

  pH……………………………………7.0~7.2

 。2)無(wú)菌水的制備

  分別取9ml蒸餾水加入5支試管中,加塞后用報紙包扎捆綁,放入高壓蒸汽滅菌鍋滅菌備用。取90ml蒸餾水加入250ml三角瓶中,同樣的操作,滅菌備用。

 。3)器皿的準備

  將刻度吸管用報紙包扎,培養皿裝入專(zhuān)用滅菌杯分別放入高溫滅菌箱滅菌備用。

  2)倒11個(gè)平板和7支試管斜面,包扎,0.1Mp、121℃、滅菌30min.

  2、制備土壤稀釋液:

  稱(chēng)取土樣10g,放入盛有250ml無(wú)菌水的帶有玻璃珠的三角瓶中,振蕩搖勻10min使土和水充分混合,然后用移液槍從三角瓶中吸取1ml(此操作要求無(wú)菌操作),加入另一盛有9ml無(wú)菌水的試管中,混合均勻,以此類(lèi)推分別制成制成0.01、0.001、0.0001、0.00001、0.000001不同稀釋度的土壤溶液。

  3、涂布培養:

  0.00001、0.000001濃度的土壤稀釋液作為涂布平板培養的對象,將其分別涂布在3個(gè)牛肉膏蛋白胨培養基中,共6個(gè)培養基,標號,37°C溫箱培養48h。

  4、選取目的菌株:

  兩天后對土壤溶液的微生物培養基進(jìn)行觀(guān)察,并取兩個(gè)菌落形態(tài)完全一致的分散的單個(gè)菌落,對其中一個(gè)噴灑盧戈氏碘液,觀(guān)察其菌落周?chē)欠癯霈F透明圈,如果出現透明圈說(shuō)明此菌株產(chǎn)淀粉酶,是目的菌株,記錄細菌明顯的性狀。

  微生物實(shí)驗報告 8

  一、實(shí)驗目的

 。ㄒ唬┱莆找话闩囵B基的制備原理及要求,掌握培養基酸堿度的測定,熟悉一般培養基的制備過(guò)程和各種器皿滅菌方法。

 。ǘ┱莆占毦蛛x培養的基本要領(lǐng)和方法,掌握細菌抹片的制備方法和革蘭氏染色法及油鏡的使用方法,并認識革蘭氏染色的反應特性。

 。ㄈ┱莆諏W(xué)習用微生物學(xué)原理診斷疾病的一般方法及步驟。

  二、實(shí)驗用品

 。ㄒ唬┢鞑

  量筒、燒杯、電子天平、漏斗、三角燒瓶、空試劑瓶、玻璃棒、玻璃平皿、刻度吸管、ph試紙、紗布、脫脂棉、天平、電爐、試劑瓶瓶塞、扎繩、放大鏡、包裝紙、洗耳球、酒精燈、載玻片、火柴、吸水紙、剪刀、記號筆、接種環(huán)、注射器、鑷子、鉗子、毫米尺、培養箱、水浴培養箱、高壓蒸汽滅菌鍋、油鏡

 。ǘ┰噭┘安牧

  肘胨、蛋白胨、豬膽鹽、氯化鈉、瓊脂、乳糖、0.01%結晶紫水溶液、0.5%中性紅水溶液、血清、胰化蛋白胨、酵母提取物、氫氧化鈉、鹽酸、牛血清、革蘭氏染色液、蒸餾水、小白鼠、病豬內臟

  三、實(shí)驗步驟

 。ㄒ唬┡囵B基的制備

 。ㄋ杏玫降钠髅蠖家121℃高壓滅菌15~30min,傾注平板在無(wú)菌操作臺內完成,并放在無(wú)菌操作臺內)

  1、麥康凱培養基

 。1)組成:蛋白胨17g、肘胨3g、豬膽鹽5g、氯化鈉5g、瓊脂17g、乳糖10g、0.01%結晶紫水溶液10ml、0.5%中性紅水溶液5ml、蒸餾水1000ml

 。2)方法:將蛋白胨、肘胨、豬膽鹽和氯化鈉溶解于400ml蒸餾水中,調節ph至7.2。將瓊脂加入600ml蒸餾水中,并加入乳糖,加熱熔化。將兩液混合,分裝于燒瓶?jì),用紗布、扎繩等捆好后,121℃高壓滅菌15~30min。待冷卻至50~ 55℃時(shí),加入結晶紫和中性紅水溶液,搖勻后傾注平板。

  注:結晶紫和中性紅水溶液配好后需經(jīng)高壓滅菌。

  2、血清平板

 。1)組成:營(yíng)養瓊脂、牛血清

 。2)方法:將滅菌的營(yíng)養瓊脂加熱熔化,冷卻至45~50℃時(shí),加入牛血清,并混勻,傾注平板。

  注:不得將牛血清一并加入后再滅菌。

  3、lb培養基

 。1)組成:胰化蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化鈉10g、瓊脂15g

 。2)方法:在950ml蒸餾水中加入胰化蛋白胨、酵母提取物、瓊脂和氯化鈉,調節ph至7.4,加熱熔化,分裝于瓶中,用紗布、扎繩等捆好后,121℃高壓滅菌15~30min。待冷卻至50~ 55℃時(shí),傾注平板。

  4、液體培養基(在lb培養基的基礎上,裝入大試劑瓶中,不加瓊脂,不分裝)

 。ǘ┎×先〔

  在病豬死亡后,首先用顯微鏡檢查其末梢血液膜片中是否有炭疽桿菌存在,未發(fā)現,則立即用消毒的器械對其進(jìn)行生理解剖,觀(guān)察其病理特征現象,取出病豬的十二指腸、胃、肝臟三處的組織物,并注意組織的完整性,用儲物袋密封保存。

 。ㄈ┘毦峙囵B

  1、消毒滅菌:操作人員先用消毒水清洗手或戴好實(shí)驗手套,再用消毒水對無(wú)菌操作臺內桌面及用酒精燈外焰對待用器械進(jìn)行火焰滅菌。

  2、接種

 。1)在無(wú)菌操作臺酒精燈旁打開(kāi)用儲物袋密封保存的病料,先左手持鑷子右手持剪刀,把病料剪出一個(gè)小口。

 。2)右手持滅過(guò)菌的接種環(huán),左手持平板,并用拇指、食指及中指將平皿揭開(kāi)約20左右,然后將接種環(huán)前端插入小口旋轉一下后,再用劃線(xiàn)接種的方法接種到一個(gè)血清平板上。

 。3)用記號筆在平板底部作好日期、操作人員、部位等標記,并將平板倒放。

  以此方法,分別接種十二指腸、胃粘膜、肝臟于血清平板上,各接種2個(gè)血清平板。

  3、培養:將接種好的血清平板倒扣放入37℃培養箱中,反向培養24小時(shí)。注:劃線(xiàn)接種時(shí)盡量劃開(kāi),以保證長(cháng)出單個(gè)菌落,且劃線(xiàn)時(shí)接種環(huán)應盡量?jì)A斜,以免劃破培養基(后同);待接種完畢后熄滅無(wú)菌操作臺內酒精燈,關(guān)閉好無(wú)菌操作臺窗口,打開(kāi)無(wú)菌操作臺內的紫外燈。 。

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  1、菌落特征判斷

  待粗培養的細菌培養24小時(shí)后,取出用放大鏡觀(guān)察記錄單個(gè)小菌落的形態(tài)特征并用實(shí)驗報告紙記錄好,并在平板底部上做好觀(guān)察標記,其形態(tài)特征包括大小、形狀、菌落邊緣、表面構造、隆起度、濕潤度、透明度、顏色等。

  2、取單個(gè)菌落進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢

 。1)取干凈的載玻片,用記號筆在其一面做好正反面標記,再在載玻片另一面中央滴上一小滴蒸餾水。

 。2)將接種環(huán)在火焰上滅菌,待冷卻后,在酒精燈旁從標記的單個(gè)小菌落中取少許細菌置于蒸餾水中混勻(同時(shí)蓋好平板倒扣置于一旁),用接種環(huán)涂成直徑約1.5cm的菌膜,再在酒精燈火焰上方以鐘擺速度通過(guò)固定好細菌,待冷卻進(jìn)行染色。

 。3)先滴加草酸結晶紫溶液染色1~2min,再水洗;然后滴加革蘭氏碘液溶液染色1~2min,再水洗;隨后滴加95%的酒精脫色30~60s,再水洗;最后滴加稀釋的品紅進(jìn)行復染30~60s,再水洗;待干燥或吸水紙吸干后鏡檢。

 。4)將干燥的載玻片放在1000倍油鏡下,滴加一滴松柏油進(jìn)行鏡檢,觀(guān)察其形態(tài)特征,判斷細菌的種屬。

  3、細菌接種培養

 。1)消毒滅菌:操作人員先用消毒水清洗手或戴好實(shí)驗手套,再用消毒水對無(wú)菌操作臺內桌面及用酒精燈外焰對待用器械進(jìn)行火焰滅菌。

 。2)接種:右手持滅過(guò)菌的接種環(huán),左手持平板,并用拇指、食指及中指將平皿揭開(kāi)約20左右,然后將接種環(huán)插入揭開(kāi)的.平板口內蘸去一下鏡檢標記的小菌落,再用劃線(xiàn)接種的方法接種到一個(gè)血清平板、lb平板或麥康凱平板上。并用記號筆在平板底部作好日期、操作人員、菌種、部位等標記,將平板倒放。

 。3)將接種好的平板倒扣放入37℃培養箱中,反向培養24小時(shí)。

  注:油鏡用完后應立即清理物鏡上的松柏油;劃線(xiàn)接種時(shí)盡量劃開(kāi),以保證長(cháng)出單個(gè)菌落;待接種完畢后熄滅無(wú)菌操作臺內酒精燈,關(guān)閉好無(wú)菌操作臺窗口,打開(kāi)無(wú)菌操作臺內的紫外燈。 。

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  1、鏡檢:用革蘭氏染色法在1000倍油鏡下鏡檢,觀(guān)察并記錄是否為純培養的細菌。

  2、分裝液體培養基:先對無(wú)菌操作臺及需要使用的器械進(jìn)行消毒滅菌,然后用鉗子揭開(kāi)一個(gè)空試劑瓶,用傾倒的方法在酒精燈旁從液體培養基大試劑瓶中分裝于空試劑瓶?jì),并立即蓋上液體培養基大試劑瓶瓶塞。

  3、接種:右手持接種環(huán),用火焰對其進(jìn)行滅菌,待冷卻后,取出純培養的平板,在無(wú)菌操作臺內酒精燈旁,蘸去少許細菌,左手傾斜液體培養基,將接種環(huán),伸入液體培養基內攪動(dòng),然后取出對接種火焰環(huán)滅菌,并用滅菌的包裝紙捆綁好后,用記號筆做好相應標記,置于一旁。

  4、培養搖菌:將接種好的液體培養基置于水浴培養箱中培養24小時(shí)。注:分裝一個(gè)培養基就接種一個(gè)培養基,不得全部分裝完后再一個(gè)一個(gè)接種。

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  1、保定:選擇健康的青壯年小白鼠,先用右手抓住尾巴,旋轉數周讓其眩暈,然后用左手的拇指和食指捏住兩耳及頭部皮膚,并翻轉左手,使其頭部朝下,以達到內臟前移的目的。

  2、接種:先用酒精棉球蘸取酒精對注射部位擦洗消毒,再用注射器注射吸取0.2ml菌液注射于小白鼠腹腔中。

  3、觀(guān)察:將接種的小白鼠放在適宜的環(huán)境下生活,并在鼠籠處用記號筆標記好接種時(shí)間、菌種等。

  4、再培養鑒定:待小白鼠死亡后,對其進(jìn)行解剖,觀(guān)察其內臟病變情況,并取肝臟直接涂在相應培養基上,在適宜條件下反向培養24小時(shí)后,取菌落細菌進(jìn)行鏡檢觀(guān)察判斷。

  注:在注射小白鼠2小時(shí)候需要觀(guān)察小白鼠是否因注射時(shí)傷害到內臟而死亡。

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