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細胞生物學(xué)實(shí)驗報告(精選5篇)
在學(xué)習、工作生活中,報告有著(zhù)舉足輕重的地位,報告包含標題、正文、結尾等。其實(shí)寫(xiě)報告并沒(méi)有想象中那么難,下面是小編幫大家整理的細胞生物學(xué)實(shí)驗報告,希望對大家有所幫助。
細胞生物學(xué)實(shí)驗報告 1
實(shí)驗目的
、睂W(xué)習并掌握動(dòng)物細胞培養的無(wú)菌操作技術(shù)。
、擦私庠毎囵B的基本方法及操作過(guò)程。
、硨W(xué)習細胞計數及營(yíng)養液的配制。
實(shí)驗原理
、奔毎囵B
原代細胞培養是指直接從動(dòng)物體內獲取的細胞、組織和器官,經(jīng)體外培養后,直到第一次傳代為止。這種培養,首先用無(wú)菌操作的方法,從動(dòng)物體內取出所需的組織(或器官),經(jīng)消化,分解成單個(gè)游離細胞,在人工培養下,使其不斷的生長(cháng)及繁殖。
細胞培養是一種操作繁瑣而又要求十分嚴謹的實(shí)驗技術(shù)。要使細胞能在體外長(cháng)期生長(cháng),必須滿(mǎn)足兩個(gè)基本要求:一是供給細胞存活所必須的條件,如適量的水、無(wú)機鹽、氨基酸、維生素、葡萄糖及其有關(guān)的生長(cháng)因子、氧氣、適宜的溫度,注意外環(huán)境酸堿度與滲透壓的調節。二是嚴格控制無(wú)菌條件。
、布毎阑铊b定死活細胞的鑒定方法有很多種,常用的有染色法和儀器分析法。染色法是常用的細胞死活鑒定方法,簡(jiǎn)便,易于操作。不同的死活細胞鑒定方法有各自不同具體的反應機理,但無(wú)論采用何種辦法,都是利用了死活細胞在生理機能和性質(zhì)上的差異。
染色法分化學(xué)染色法和熒光染色法,根據染色機理的不同,染料或使死細胞著(zhù)色,或使活細胞著(zhù)色。
死活細胞在生理機能和性質(zhì)上的差異主要包括:
☆死活細胞細胞膜通透性的差異:活細胞的細胞膜是一種選擇性膜,對細胞起保護和屏障作用,只允許物質(zhì)選擇性的.通過(guò);而細胞死亡之后,細胞膜受損,通透性增加。常用的以臺盼藍鑒別細胞死活的方法就是利用了這一性質(zhì)。臺盼藍,又稱(chēng)錐藍,是一種陰離子型染料,不能通過(guò)完整的細胞膜。所以經(jīng)臺盼藍染色后只能使死細胞著(zhù)色,而活細胞不被著(zhù)色。甲基藍有類(lèi)似的染色機理。植物細胞的質(zhì)壁分離也可鑒定死活。
☆死活細胞在代謝上的差異:是采用美藍染料鑒定酵母細胞死活的依據。美藍是一種無(wú)毒染料,氧化型為藍色,還原型為無(wú)色。由于活細胞中新陳代謝的作用,使細胞內具有較強的還原能力,能使美藍從藍色的氧化性變?yōu)闊o(wú)色的還原型,因此美藍染色后活的酵母細胞無(wú)色;而死細胞或代謝緩慢的老細胞,則因它們的無(wú)還原能力或還原能力極弱,使美藍處于氧化態(tài),從而被染成藍色或淡藍色。
除此之外,還有一些細胞器的專(zhuān)有染料。如液泡系的專(zhuān)有染料中性紅。中性紅是一種低毒性染料,可以使活細胞液泡著(zhù)紅色,而細胞質(zhì)和細胞核不被著(zhù)色;死細胞的液泡不被著(zhù)色或淺染,染料彌散于整個(gè)細胞中,細胞核和細胞質(zhì)被染成紅色。有時(shí)侯為了增加染色效果可以將兩種染料結合使用,如甲基藍-中性紅混合染色法。
實(shí)驗用品
、辈牧闲“资
、苍噭
臺盼藍、伊紅、PBS緩沖液、細胞培養液(含生長(cháng)因子)
、称鞑
剪子、棉球、75%酒精、移液槍、無(wú)菌操作臺、正置光學(xué)顯微鏡、倒置光學(xué)顯微鏡、解剖盤(pán)、滴管、離心管、離心機、注射器、Eppendorf管、培養皿、酒精燈、塑料培養皿、載玻片、蓋玻片、血細胞計數板
實(shí)驗步驟
、比〔
取小鼠一只,采用斷頭法處死。清水洗小鼠浸入75%酒精中消毒3min,取出轉入超凈工作臺內的解剖盤(pán)中,無(wú)菌操作打開(kāi)腹腔,取出其脾臟,除去其周?chē)闹窘M織,并用PBS液自上而下淋洗1-2次,轉入無(wú)菌培養皿中待用。
、卜蛛x脾細胞
用滴管向培養皿中注入30滴PBS緩沖液,再用“L”型針頭注射器在皿中吸取0.2毫升PBS液注入脾臟,注射時(shí)沿長(cháng)軸注射。然后再用針頭在脾臟上扎眼,并用“L”型針頭輕輕刮出脾細胞。在均勻吹勻脾臟細胞。
吸取上述分離的單個(gè)脾細胞懸液,放入Eppendorf管中,使量至1mL,以1000r/min離心5min。⒊培養脾細胞
取塑料培養皿一套,用移液槍吸取培養液2mL加入塑料皿中,并將皿標記待用。取離心后的Eppendorf管,棄去上清液,用移液槍?zhuān)?00ul)吸取塑料皿中的培養液400ul加入棄去上清的Eppendorf管中,用槍頭吹勻管底的脾細胞,吸取200ul脾細胞懸液接種于上述塑料皿中,混勻后放入37°C,5%CO2的培養箱中培養。
、磁渲迫疽
用生理鹽水配成5%臺盼藍染液,備用。⒌染色
取0.5mL細胞懸濁液放入試管中,加入1-2滴染液;旌。2-5min后將細胞放在血細胞計數板上觀(guān)察死活情況,注意不要有
氣泡產(chǎn)生,放大倍數為10x10。染色后活細胞不著(zhù)色,死細胞顯示藍色。注意染色時(shí)間不能超過(guò)15min,否則染液將細胞毒殺。
、队嫈
在10x10倍的顯微鏡下觀(guān)察,計算血細胞計數板的4個(gè)4小方格的細胞數量。包括細胞總數與死細胞數量。壓線(xiàn)者計上不計下,計左不計右。
、酚嬎慵毎盍
根據公式:細胞活力=(總細胞數-死細胞數)/總細胞數×100%
實(shí)驗結果
臺盼藍染色后的細胞(10x10)伊紅染色后的細胞(10x10)
總細胞數和活細胞數統計表(10×10)
項目自己培養細胞老師培養細胞總細胞數個(gè)/ml活細胞數個(gè)/ml細胞活力1.4×1067.5×1053.0×1055.5×10521.4%73.3%分析與討論
、苯Y果分析
本次實(shí)驗中我們小組自己培養細胞所測細胞活力為21.4%,并不算高,分析得應有以下原因可能影響實(shí)驗結果(包括誤差):
、湃粼跓o(wú)菌操作的過(guò)程中操作不規范,導致染菌,會(huì )極大的影響觀(guān)察,導致實(shí)驗失敗。
、迫粼陔x心分離呈單細胞的過(guò)程中離心機轉速過(guò)快或時(shí)間過(guò)長(cháng)很可能會(huì )導致細胞破裂,導致小鼠脾細胞大量死亡。
、侨旧珪r(shí)間過(guò)長(cháng),或觀(guān)察時(shí)間過(guò)長(cháng)都會(huì )導致染色試劑將細胞殺死,使細胞活力驟降,這是導致細胞活力比較低的重要原因。
、葘(shí)驗中的一些操作不正確或不規范的情況、計算帶來(lái)的誤差等也會(huì )直接導致實(shí)驗誤差。
、沧⒁馐马
、艊栏襁M(jìn)行動(dòng)物消毒,需用75%酒精消毒。
、茋栏襁M(jìn)行無(wú)菌操作,防止細菌、霉菌、支原體污染,避免化學(xué)物質(zhì)污染。
、俏∫后w前,瓶口和吸管硬行火焰消毒;吸取液體時(shí),避免碰撞。
、入x心管入臺前,管口、管壁應消毒。
、蓪(shí)驗者離開(kāi)超凈臺時(shí),要隨時(shí)用肘部關(guān)閉工作窗。
、势鞑氖褂脮r(shí)既要注意用火焰消毒,又要防止燙傷、燙死細胞。
細胞生物學(xué)實(shí)驗報告 2
一、實(shí)驗目的:
1、通過(guò)對原核和真核各種形態(tài)細胞的光學(xué)顯微鏡觀(guān)察,了解細胞的形態(tài)及其顯微結構;
2、學(xué)習顯微測量的方法,對細胞的大小有一直觀(guān)認識。
二、實(shí)驗材料和儀器:
小白鼠肝細胞切片;雞血紅細胞;蠶豆葉片橫切片;
普通光學(xué)顯微鏡;目鏡測微尺;鏡臺測微尺;載玻片;蓋玻片。
三、實(shí)驗步驟:
(一)細胞形態(tài)觀(guān)察
l、動(dòng)物細胞的觀(guān)察
。1)人肝細胞切片:在顯微鏡下仔細觀(guān)察肝細胞的形態(tài)構造。
。2)雞血細胞涂片的觀(guān)察:觀(guān)察血細胞的組成;紅細胞、白細胞、血小板的形態(tài)特點(diǎn)。
2、植物細胞的觀(guān)察
取蠶豆葉片橫切片的觀(guān)察:注意表皮細胞和葉肉細胞的基本結構。
。ǘ┘毎'大小和測量
1、卸下目鏡的上透鏡,將目鏡測微尺刻度向下裝在目鏡的焦平面上,再旋上目鏡的上透鏡。
2、將鏡臺測微尺刻度向上放在鏡臺上夾好,使測微尺分度位于視野中央。調焦至能看清鏡臺測微尺的分度。
3、小心移動(dòng)鏡臺測微尺和轉動(dòng)目鏡測微尺(如目鏡測微尺分度模糊,可轉動(dòng)目鏡上透鏡進(jìn)行調焦),使兩尺左邊的一直線(xiàn)重合,然后由左向右找出兩尺另一次重合的直線(xiàn)。
4、記錄兩條重合線(xiàn)間目鏡測微尺和鏡臺測微尺的格數。按下式計算目鏡測微尺每格等于多少μm:
鏡臺測微尺的格數
目鏡測微尺每格的微米數=————————— × 10
目鏡測微尺的格數
四、實(shí)驗結果:
1、目鏡校正:40倍顯微鏡目鏡測微尺每格的微米數=17/70=0.24
2、細胞大小的測量:
五、作業(yè)與思考:
1、血細胞按含量高低,主要含有:紅細胞,白細胞,血小板。
白細胞最大,紅細胞次之,血小板最小。紅細胞:主要的功能是運送氧。 白細胞:主要扮演了免疫的角色,當病菌侵入人體時(shí),白細胞能穿過(guò)毛細血管壁,集中到病菌入侵部位,將病菌包圍,吞噬。血小板:止血過(guò)程中起著(zhù)重要作用。細胞形態(tài)見(jiàn)下圖。
2、植物細胞一般比動(dòng)物細胞大一些。形態(tài)圖見(jiàn)下。
3、在不同放大倍數下,測定的細胞大小基本一致,但有一些偏差。放大倍數越大,在視野中同等實(shí)際距離下的兩點(diǎn)視野距離更大,而更容易測量準確。
細胞生物學(xué)實(shí)驗報告 3
一、實(shí)驗目的
1.觀(guān)察植物細胞有絲分裂的過(guò)程,識別有絲分裂的不同時(shí)期。
2.初步掌握制作洋蔥根尖有絲分裂裝片的技能。
3.初步掌握繪制生物圖的.方法。
二、實(shí)驗原理
在植物體中,有絲分裂常見(jiàn)于根尖、莖尖等分生區細胞,高等植物細胞有絲分裂的過(guò)程,分為分裂間期和分裂期的前期、中期、后期、末期?梢杂酶弑讹@微鏡觀(guān)察植物細胞的有絲分裂的過(guò)程,根據各個(gè)時(shí)期細胞內染色體(或染色質(zhì))的變化情況,識別該細胞處于有絲分裂的哪個(gè)時(shí)期,細胞核內的染色體容易被堿性染料著(zhù)色。
三、材料用具
洋蔥根尖、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、培養皿、鉛筆、質(zhì)量分數為15%的鹽酸、體積分數為95%的酒精、質(zhì)量分數為0.01g/ml的龍膽紫(或紫藥水)
四、實(shí)驗過(guò)程(見(jiàn)書(shū)P39)
1.洋蔥根尖的培養(提前3—4天)
2.解離:5min
3.漂洗:10min
4.染色:5min
5.制片
6.鏡檢
五、注意
1.解離充分是實(shí)驗成功的必備條件。解離充分,組織才能分散,細胞也不會(huì )重疊。
2.漂洗時(shí)間一定要足夠,否則細胞染不上色。
3.染色時(shí),染液的濃度和染色時(shí)間必須掌握好。特別是染色不能過(guò)深,否則鏡下一片紫色,無(wú)法觀(guān)察。
六、討論
1.制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵是什么?談?wù)勀阕约旱捏w會(huì )。
2.在觀(guān)察清楚有絲分裂各個(gè)時(shí)期的細胞以后,繪出洋蔥根尖細胞有絲分裂的簡(jiǎn)圖,并標明時(shí)期。
細胞生物學(xué)實(shí)驗報告 4
一、實(shí)驗目的
1. 初步學(xué)會(huì )觀(guān)察植物細胞質(zhì)壁分離和復原的方法。
2. 理解植物細胞發(fā)生滲透作用的原理。
二、實(shí)驗原理
當細胞液的濃度小于外界溶液的濃度時(shí),細胞液中的水分就通過(guò)原生質(zhì)層進(jìn)入外界溶液中,使細胞壁和原生質(zhì)層都出現一定的收縮。由于原生質(zhì)層比細胞壁的收縮性大,當細胞不斷失水時(shí),原生質(zhì)層就會(huì )與細胞壁逐漸分離開(kāi),也就是分升了質(zhì)壁分離當細胞液的濃度大于外界溶液的'濃度時(shí),外界溶液中的水分就通過(guò)原生質(zhì)層進(jìn)入細胞液中,整個(gè)原生質(zhì)層就會(huì )慢慢地恢復成原來(lái)的狀態(tài),使植物細胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復原。
三、材料用具
紫色洋蔥鱗片葉、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、刀片、吸水紙、清水、0.3g/ml蔗糖溶液
四、實(shí)驗過(guò)程(見(jiàn)書(shū)P60)
物理實(shí)驗報告 ——化學(xué)實(shí)驗報告 ——生物實(shí)驗報告 ——實(shí)驗報告格式 ——實(shí)驗報告模板
五、討論
1.如果將洋蔥表皮細胞浸潤在與細胞液濃度相同的蔗糖溶液中,這些表皮細胞會(huì )出現什么現象?
2.當紅細胞細胞膜兩側的溶液具有濃度差時(shí),紅細胞會(huì )不會(huì )發(fā)生質(zhì)壁分離現象?為什么?
3.畫(huà)一個(gè)細胞在正常狀態(tài)下到經(jīng)過(guò)0.3g/ml蔗糖溶液處理,再經(jīng)過(guò)清水處理的細胞變化的一系列模式圖。
細胞生物學(xué)實(shí)驗報告 5
一、實(shí)驗目的
1、初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。
2、觀(guān)察高等植物的葉綠體在細胞質(zhì)基質(zhì)中的形態(tài)和分布
二、實(shí)驗原理
高等植物的葉綠體呈橢球狀,在不同的.光照條件下,葉綠體可以運動(dòng),改變橢球體的方向,這樣既能接受較多的光照,又不至于被強光灼傷。在強光下,葉綠體以其橢球體的側面朝向光源;在弱光下,葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此,在不同光照條件下采集的葫蘆蘚,其小葉內葉綠體橢球體的形狀不完全一樣。
活細胞中的細胞質(zhì)處于不斷的流動(dòng)狀態(tài),觀(guān)察細胞質(zhì)的流動(dòng),可以用細胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體的運動(dòng)做為標志。
三、材料用具
蘚類(lèi)的葉,新鮮的黑藻,顯微鏡,載玻片,蓋玻片,滴管,鑷子,刀片,培養皿,鉛筆
四、實(shí)驗過(guò)程
1、制作蘚類(lèi)葉片的臨時(shí)裝片
2、用顯微鏡觀(guān)察葉綠體
3、制作黑藻葉片臨時(shí)裝片
4、用顯微鏡觀(guān)察細胞質(zhì)流動(dòng)
五、討論
1、細胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體是否靜止不動(dòng),為什么?
2、葉綠體的形態(tài)和分布與葉綠體的功能有什么關(guān)系?
3、植物細胞的細胞質(zhì)處于不斷的流動(dòng)狀態(tài),這對于活細胞完成生命活動(dòng)有什么意義?
4、用鉛筆畫(huà)一個(gè)葉片細胞,標出葉綠體的大致流動(dòng)方向。
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