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高中生物細胞培養的實(shí)驗
1.玻璃吸管和玻璃培養瓶的消毒:1)高壓蒸汽滅菌15分鐘以上;2)干烤消毒140度2小時(shí)以上;
2.無(wú)菌工作臺先清洗后用75%酒精擦拭干凈,紫外線(xiàn)照射40分鐘以上;各種培養板照射3小時(shí)以上;
3.培養基(pH7.2)和血清配制好后要做無(wú)菌試驗:將血清按10%加入培養基內,用無(wú)菌的玻璃離心管或玻璃瓶取完全培養基5-10ml置培養箱內培養2-3天,肉眼見(jiàn)無(wú)渾濁或沉淀等異物.分裝后置-20度保存;
4.消化液(pH7.8)或其它加入液,應用高壓蒸汽滅菌或一次性無(wú)菌濾器過(guò)濾除菌,分裝成支置-20度保存;
5.各種炒嫻囊禾甯次率庇Ρ咭”呷諢?否則有的液體(特別是培養基)容易產(chǎn)生沉淀.
6.培養箱應先用清水清洗后用75%酒精擦拭一遍(如有紫外線(xiàn)的應照射1小時(shí)以上,如有高溫滅菌的應按程序來(lái)菌).至少每月一次.
7.進(jìn)入操作時(shí)應注意先清洗雙手及手腕,然后用75%酒精擦拭,操作時(shí)注意無(wú)菌臺內空間層次.手及物品不要在暴露的瓶口上方來(lái)往,如果數量較多,培養瓶應放在與酒精燈平行地方便于操作,瓶與瓶之間應相隔一定的距離,開(kāi)瓶(蓋)時(shí)應先用75%酒精反復擦拭或用燈燒,開(kāi)開(kāi)后應用燈先燒口,然后燒蓋.用完后同樣操作.整個(gè)操作過(guò)程盡量在無(wú)菌臺靠里面一點(diǎn).
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