高中生物選修3的知識點(diǎn)

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高中生物選修3的知識點(diǎn)

  高考高中生物選修知識點(diǎn)

  專(zhuān)題一基因工程

  基因工程的概念

高中生物選修3的知識點(diǎn)

  基因工程是指按照人們的愿望,進(jìn)行嚴格的設計,通過(guò)體外DNA重組和轉基因技術(shù),賦予生物以新的遺傳特性,創(chuàng )造出更符合人們需要的新的生物類(lèi)型和生物產(chǎn)品;蚬こ淌窃贒

 。ㄒ唬┗蚬こ痰幕竟ぞ

  1.“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內切酶(限制酶)

 。1)來(lái)源:

  主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的。(2)功能:

  能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi),因此具有專(zhuān)一性。(3)結果:

  經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA 片段末端通常有兩種形式:黏性末端和平末端。

  2.“分子縫合針”——(1)兩種DNA連接酶(E·coliDNA連接酶和T4-DNA連接酶)的比較:

 、傧嗤c(diǎn):都縫合磷酸二酯鍵。②區別:

  E·coliDNA將雙鏈DNA酯鍵連接起來(lái);而T4DNA端,但連接平末端的之間的效率較低。(2)與DNA聚合酶作用的異同:

  DNA聚合酶只能將單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接兩個(gè)DNA 片段的末端,形成磷酸二酯鍵。

  3.“分子運輸車(chē)”——載體(1)載體具備的條件:

 、倌茉谑荏w細胞中復制并穩定保存。

 、诰哂幸恢炼鄠(gè)限制酶切點(diǎn),供外源DNA 片段插入。

 、劬哂袠擞浕,供重組DNA的鑒定和選擇。(2)最常用的載體是質(zhì)粒,它是一種裸露的、結構簡(jiǎn)單的、獨立于細菌染色體之外,并具有自我復制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。(3)其它載體:噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。


  (二)基因工程的基本操作程序

  第一步:目的基因的獲取

  1.目的基因是指:編碼蛋白質(zhì)的結構基因。2.合成。人工合成目的基因的常用方法有反轉錄法_和化學(xué)合成法_。3.PCR技術(shù)擴增目的基因(1)原理:DNA雙鏈復制(2)過(guò)程:

  第一步:加熱至90~95℃DNA解鏈;

  第二步:冷卻到55~60℃,引物結合到互補D第三步:加熱至70~75℃,熱穩定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成。

  第二步:基因表達載體的構建1.目的:并且可以遺傳至下一代,使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。2.組成:目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標記基因(1)啟動(dòng)子:是一段有特殊結構的DNA 片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶識別和結合的部位,能驅動(dòng)基因轉錄出mRNA,最終獲得所需的蛋白質(zhì)。

 。2)終止子:也是一段有特殊結構的DNA 片段,位于基因的尾端。

 。3)標記基因的作用:是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來(lái)。常用的標記基因是抗生素基因。

  第三步:將目的基因導入受體細胞_1.轉化的概念:

  是目的基因進(jìn)入受體細胞內,并且在受體細胞內維持穩定和表達的過(guò)程。2.常用的轉化方法:

  將目的基因導入植物細胞:采用最多的方法是農桿菌轉化法,其次還有基因槍法和花粉管通道法等。

  將目的基因導入動(dòng)物細胞:最常用的方法是顯微注射技術(shù)。此方法的受體細胞多是受精卵。

  將目的基因導入微生物細胞:原核生物作為受體細胞的原因是繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少,最常用的原核細胞是大腸桿

  4.因抗蟲(chóng)植物是否出現抗蟲(chóng)性狀。

 。ㄈ┗蚬こ痰膽1.植物基因工程:

  抗蟲(chóng)、抗病、抗逆轉基因植物,利用轉基因改良植物的品質(zhì)。2.動(dòng)物基因工程:

  提高動(dòng)物生長(cháng)速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物。3.基因治療:

  把正常的'外源基因導入病人體內,使該基因表達產(chǎn)物發(fā)揮作用。

  菌,其轉化方法是:先用Ca2+處理細胞,使其成為感受態(tài)細胞,再將重組表達載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合,在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細胞吸收DNA分子,完成轉化過(guò)程。

  3.重組細胞導入受體細胞后,篩選含有基因表達載體受體細胞的依據是標記基因是否表達。

  第四步:目的基因的檢測和表達

  1.插入了目的基因,方法是采用DNA分子雜交技術(shù)。

  2.,方法是采用用標記的目的基因作探針與

  3.最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),方法是從轉基因生物中提取蛋白質(zhì),用相應的抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交。

 。ㄋ模┑鞍踪|(zhì)工程的概念

  蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結構規律及其生物功能的關(guān)系作為基礎,通過(guò)基因修飾或基因合成,對現有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿(mǎn)足人類(lèi)的生產(chǎn)和生活的需求。(基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì))

  專(zhuān)題2細胞工程

 。ㄒ唬┲参锛毎こ

  1.理論基礎(原理):細胞全能性

  2全能性表達的難易程度:受精卵>生殖細胞>干細胞>體細胞;植物細胞>動(dòng)物細胞

  植物組織培養技術(shù)(1)過(guò)程:

  離體的植物器官、組織或細胞―→愈傷組織―→試管苗―→植物體(2)用途:

  微型繁殖、作物脫毒、制造人工種子、單倍體育種、細胞產(chǎn)物的工廠(chǎng)化生產(chǎn)。(3)地位:

  是培育轉基因植物、植物體細胞雜交培育植物新品種的最后一道工序。

  3.植物體細胞雜交技術(shù)(1)過(guò)程:

  胞分裂生長(cháng)到表面相互抑制時(shí),細胞就會(huì )停止分裂增殖,這種現象稱(chēng)為細胞的接觸抑制。(4)動(dòng)物細胞培養需要滿(mǎn)足以下條件:①無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:

  培養液應進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養液中添加一定量的抗生素,以防培養過(guò)程中的污染。此外,應定期更換培養液,防止代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害。②營(yíng)養:

  合成培養基成分:糖、氨基酸、促生長(cháng)因子、無(wú)機鹽、微量元素等。通常需加入血清、血漿等天然成分。

 、蹨囟龋哼m宜溫度:哺乳動(dòng)物多是36.5℃+0.pH:④氣體環(huán)境:

  95%空氣+O2是細胞代謝所必需的,CO2pH。(5)動(dòng)物細胞培養技術(shù)的應用:

  制備病毒疫苗、制備單克隆抗體、檢測有毒物質(zhì)、培養醫學(xué)研究的各種細胞。

 。2)誘導融合的方法:物理法包括離心、振動(dòng)、電刺激等;瘜W(xué)法一般是用聚乙二醇(PEG)作為誘導劑。

 。3)意義:克服了遠緣雜交不親和的障礙。

 。ǘ﹦(dòng)物細胞工程

  1.動(dòng)物細胞培養(1)概念:

  動(dòng)物細胞培養就是從動(dòng)物機體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細胞,然后放在適宜的培養基中,讓這些細胞生長(cháng)和繁殖。(2)動(dòng)物細胞培養的流程:

  取動(dòng)物組織塊(動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織)→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細胞→制成細胞懸液→轉入培養瓶中進(jìn)行原代培養→貼滿(mǎn)瓶壁的`細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細胞繼續傳代培養。

 。3)細胞貼壁和接觸抑制:

  懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上,稱(chēng)為細胞貼壁。細胞數目不斷增多,當貼壁細

  3

  2.動(dòng)物體細胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物

 。1)哺乳動(dòng)物核移植可以分為胚胎細胞核移植(比較容易)和體細胞核移植(比較難)。(2)選用去核卵(母)細胞的原因:卵(母)細胞比較大,容易操作;卵(母)細胞細胞質(zhì)多,營(yíng)養豐富。

 。3)體細胞核移植技術(shù)的應用:

 、偌铀偌倚筮z傳改良進(jìn)程,促進(jìn)良畜群繁育;②保護瀕危物種,增大存活數量;

 、凵a(chǎn)珍貴的醫用蛋白;④作為異種移植的供體;⑤用于組織器官的移植等。

 。4)體細胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題:

  4克隆動(dòng)物存在著(zhù)健康問(wèn)題、表現出遺傳和生理缺陷等。

  動(dòng)物細胞融合

  動(dòng)物細胞融合也稱(chēng)細胞雜交,是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細胞結合形成一個(gè)細胞的過(guò)程。融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細胞遺傳信息的單核細胞,稱(chēng)為雜交細胞。

  動(dòng)物細胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同,誘導動(dòng)物細胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法類(lèi)似,常用的誘導因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激等。

  動(dòng)物細胞融合的意義:克服了遠緣雜交的不親和性,成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。

  4.單克隆抗體

  抗體:一個(gè)B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體。從血清中分離出的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差。

  雜交瘤細胞的特點(diǎn):既能大量繁殖,又能產(chǎn)生專(zhuān)一的抗體。

  單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):特異性強,靈敏度高,并能大量制備。

  單克隆抗體的作用:

 、僮鳛樵\斷試劑:準確識別各種抗原物質(zhì)的細微差異,并跟一定抗原發(fā)生特異性結合,具有準確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)。

 、谟糜谥委熂膊『瓦\載藥物:主要用于治療癌癥治療,可制成“生物導彈”,也有少量用于治療其它疾病。

  

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