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醫學(xué)生物學(xué)實(shí)驗重點(diǎn)
移液管的使用：吸—擦—調—放量取4.5毫升液體用什么移液管：應該用10ml吸量管（注意看書(shū)p5下方吸量管的種類(lèi)和使用）
微量加樣器的使用：裝吸液頭之后扭一下，保證不漏氣，吸液到第一停止點(diǎn)，緩慢釋放按鈕，停留1s，滑出，擦去吸液頭外面的液體，不擦尖端。放液先到第一停止點(diǎn)，停1s，到第二停止點(diǎn)，放液要貼壁，也是滑出。
分光光度法的原理：Lambert-Beer定律光吸收和什么因素有關(guān)A=-lgT直接比較法（公式法）、標準曲線(xiàn)法。標準曲線(xiàn)法A為縱坐標，濃度為橫坐標，取直線(xiàn)部分作定量依據。
凝膠層析：分子量大的先出，考了一道給了四種蛋白質(zhì)的分子量，問(wèn)哪個(gè)先出的。還考了一道分離不同分子量的蛋白質(zhì)用什么層析的。（親和層析、薄層層析的原理最好也看看吧）
離子交換層析：和后邊的血清γ球蛋白的實(shí)驗一起考了好幾道題，等電點(diǎn)的概念還有離子交換層析的原理一定要清楚，題目會(huì )變換一下流動(dòng)相的ph什么的來(lái)考。咱們實(shí)驗用的是DEAE—纖維素陰離子交換劑，具有堿性基團，和流動(dòng)相中的陰離子進(jìn)行交換。
離心機的使用：尤其注意平衡哦~根據轉速的離心機的分類(lèi)低速<6000r/min<高速<25000r/min<超速
各種離心方法：差速離心、密度梯度離心（速度區帶離心、等密度離心）、超速離心，要知道各種離心方法適用于分離什么。
光學(xué)顯微鏡的操作：左眼觀(guān)察右眼看圖，左手調焦右手移片或繪圖。低倍鏡轉到高倍鏡需要光圈調大。油鏡也出了一個(gè)選項，可以瞅一眼。
蟾蜍軟骨細胞中性紅染色：淡紅色的是細胞核和核仁，玫瑰紅色的是高爾基液泡。
大蒜根尖用鹽酸水解之后為什么要用蒸餾水洗3s
亞細胞組分沉降的先后：最先離心出的是細胞核，然后是線(xiàn)粒體，最終上清中是微粒體。沉降速度：細胞核>線(xiàn)粒體>微粒體。細胞核用甲基綠—派洛寧染色，甲基綠染的是DNA，綠色，派洛寧染RNA，紅色。為什么用冷玻片？細胞核過(guò)酒精是密度由高到低，每次5min。在丙酮中分色時(shí)間過(guò)長(cháng)會(huì )？詹納斯綠B染線(xiàn)粒體，綠色。
永久制片觀(guān)察：鐵蘇木精染線(xiàn)粒體：藍色。鍍銀染色：高爾基體，網(wǎng)狀，深棕色�？捡R斯亮藍染微絲束，藍色。DNA的特異顯示方法（feulgen反應）：60°C鹽酸水解使醛基暴露，和Schiff氏試劑（無(wú)色亞硫酸品紅）反應成紫紅色化合物�？剂艘坏罏槭裁春拖７蛟噭┓磻旁诔閷侠�，避光防止變質(zhì)。胞質(zhì)被亮綠染成綠色。
乳酸脫氫酶在細胞中的定位分析：乳酸脫氫酶催化乳酸脫氫，傳遞給NAD+,顯色的是四唑鹽被還原成的雙甲臜藍紫色沉淀。
糖原同樣是希夫試劑和游離醛基反應，成為PAS反應。蘇丹黑染脂類(lèi)為黑色。
蛋白質(zhì)含量的folin—酚法測定：酪氨酸帶有酚基，堿性條件下與銅離子螯合，使磷鉬酸—磷鎢酸還原生成藍紫色化合物，深淺可用分光光度法測，與蛋白質(zhì)含量成正比。（考了銅離子和氧化還原反應、空白對照管）
血清γ球蛋白：前一部分初步分離是設計性實(shí)驗哦~要提前自己設計，寫(xiě)實(shí)驗報告，實(shí)驗之后再寫(xiě)一份~考了好幾道離子交換柱層析的，改流動(dòng)相的ph先流出的是哪個(gè)蛋白啊，
DEAE—纖維素的處理啊，層析的步驟順序啊，還有用20%磺基水楊酸檢驗蛋白質(zhì)。SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳考了SDS作用、β巰基乙醇的作用、催化劑和引發(fā)劑、上下各是正負極、顯色、濃縮膠和分離膠的上下和緩沖液的ph、濃縮膠的作用、分離膠的作用（分
子篩）、氯離子蛋白質(zhì)甘氨酸的遷移率、垂直板不連續電泳。染色用的是考馬斯亮藍，指示劑用的是溴酚藍。這個(gè)實(shí)驗考了好多啊，好好看啊~！
血清谷丙轉氨酶活性測定：血清提供的是酶（不是底物不是產(chǎn)物哦~）、丙酮酸和2,4—二硝基苯肼在堿性條件下生成棕色的丙酮酸二硝基苯腙、活性單位是每毫升血清在ph=7.4,37°C保溫30min每生成2.5μg丙酮酸作為一個(gè)酶活性單位。520nm比色。
唾液淀粉酶透析之后活性下降是缺了什么。提取酶主要是看酶的比活力還是神馬。。。
其實(shí)實(shí)驗步驟和原理明白了就好了，還要看看書(shū)前面的那些操作使用方法和原理。
量取4.5毫升液體用什么移液管：應該用10ml吸量管（注意看書(shū)p5下方吸量管的種類(lèi)和使用）
微量加樣器的使用：裝吸液頭之后扭一下，保證不漏氣，吸液到第一停止點(diǎn)，緩慢釋放按鈕，停留1s，滑出，擦去吸液頭外面的液體，不擦尖端。放液先到第一停止點(diǎn)，停1s，到第二停止點(diǎn)，放液要貼壁，也是滑出。
分光光度法的原理：Lambert-Beer定律光吸收和什么因素有關(guān)A=-lgT直接比較法（公式法）、標準曲線(xiàn)法。標準曲線(xiàn)法A為縱坐標，濃度為橫坐標，取直線(xiàn)部分作定量依據。
凝膠層析：分子量大的先出，考了一道給了四種蛋白質(zhì)的分子量，問(wèn)哪個(gè)先出的。還考了一道分離不同分子量的蛋白質(zhì)用什么層析的。（親和層析、薄層層析的原理最好也看看吧）
離子交換層析：和后邊的血清γ球蛋白的實(shí)驗一起考了好幾道題，等電點(diǎn)的概念還有離子交換層析的原理一定要清楚，題目會(huì )變換一下流動(dòng)相的ph什么的來(lái)考。咱們實(shí)驗用的是DEAE—纖維素陰離子交換劑，具有堿性基團，和流動(dòng)相中的陰離子進(jìn)行交換。
離心機的使用：尤其注意平衡哦~根據轉速的離心機的分類(lèi)低速<6000r/min<高速<25000r/min<超速
各種離心方法：差速離心、密度梯度離心（速度區帶離心、等密度離心）、超速離心，要知道各種離心方法適用于分離什么。
光學(xué)顯微鏡的操作：左眼觀(guān)察右眼看圖，左手調焦右手移片或繪圖。低倍鏡轉到高倍鏡需要光圈調大。油鏡也出了一個(gè)選項，可以瞅一眼。
蟾蜍軟骨細胞中性紅染色：淡紅色的是細胞核和核仁，玫瑰紅色的是高爾基液泡。
大蒜根尖用鹽酸水解之后為什么要用蒸餾水洗3s
亞細胞組分沉降的先后：最先離心出的是細胞核，然后是線(xiàn)粒體，最終上清中是微粒體。沉降速度：細胞核>線(xiàn)粒體>微粒體。細胞核用甲基綠—派洛寧染色，甲基綠染的是DNA，綠色，派洛寧染RNA，紅色。為什么用冷玻片？細胞核過(guò)酒精是密度由高到低，每次3min。在丙酮中分色時(shí)間過(guò)長(cháng)會(huì )？詹納斯綠B染線(xiàn)粒體，綠色。
永久制片觀(guān)察：鐵蘇木精染線(xiàn)粒體：藍色。鍍銀染色：高爾基體，網(wǎng)狀，深棕色�？捡R斯亮藍染微絲束，藍色。DNA的特異顯示方法（feulgen反應）：60°C鹽酸水解使醛基暴露，和Schiff氏試劑（無(wú)色亞硫酸品紅）反應成紫紅色化合物�？剂艘坏罏槭裁春拖７蛟噭┓磻旁诔閷侠�，避光防止變質(zhì)。胞質(zhì)被亮綠染成綠色。
乳酸脫氫酶在細胞中的定位分析：乳酸脫氫酶催化乳酸脫氫，傳遞給NAD+,顯色的是四唑鹽被還原成的雙甲臜藍紫色沉淀。
糖原同樣是希夫試劑和游離醛基反應，成為PAS反應。蘇丹黑染脂類(lèi)為黑色。
蛋白質(zhì)含量的folin—酚法測定：酪氨酸帶有酚基，堿性條件下與銅離子螯合，使磷鉬酸—磷鎢酸還原生成藍紫色化合物，深淺可用分光光度法測，與蛋白質(zhì)含量成正比。（考了銅離子和氧化還原反應、空白對照管）
血清γ球蛋白：前一部分初步分離是設計性實(shí)驗哦~要提前自己設計，寫(xiě)實(shí)驗報告，實(shí)驗之后再寫(xiě)一份~考了好幾道離子交換柱層析的，改流動(dòng)相的ph先流出的是哪個(gè)蛋白啊，DEAE—纖維素的處理啊，層析的步驟順序啊，還有用20%磺基水楊酸檢驗蛋白質(zhì)。SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳考了SDS作用、β巰基乙醇的作用、催化劑和引發(fā)劑、上下各是正負極、顯色、濃縮膠和分離膠的上下和緩沖液的ph、濃縮膠的作用、分離膠的作用（分子篩）、氯離子蛋白質(zhì)甘氨酸的遷移率、垂直板不連續電泳。染色用的是考馬斯亮藍，指示劑用的是溴酚藍。這個(gè)實(shí)驗考了好多啊，好好看啊~！
血清谷丙轉氨酶活性測定：血清提供的是酶（不是底物不是產(chǎn)物哦~）、丙酮酸和2,4—二硝基苯肼在堿性條件下生成棕色的丙酮酸二硝基苯腙、活性單位是每毫升血清在ph=7.4,37°C保溫30min每生成2.5μg丙酮酸作為一個(gè)酶活性單位。520nm比色。
唾液淀粉酶透析之后活性下降是缺了什么。提取酶主要是看酶的比活力還是神馬。。。
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