腋區解剖實(shí)驗報告

腋區解剖實(shí)驗報告

　　在現實(shí)生活中，報告與我們的生活緊密相連，報告具有成文事后性的特點(diǎn)。那么大家知道標準正式的報告格式嗎？以下是小編收集整理的腋區解剖實(shí)驗報告，僅供參考，歡迎大家閱讀。

　　蛙類(lèi)坐骨神經(jīng)–腓腸肌標本制備、不同頻率刺激對肌肉收縮的影響

　　一、目的要求

　　1、掌握蛙類(lèi)雙毀髓的試驗方法；

　　2、掌握坐骨神經(jīng)—腓腸肌標本標本的制作方法；

　　3、觀(guān)察不同刺激頻率對骨骼肌收縮形式的影響。

　　二、基本原理

　　蛙類(lèi)動(dòng)物的某些基本活動(dòng)，如神經(jīng)的生物電活動(dòng)、肌肉收縮等與哺乳動(dòng)物相似。其離體組時(shí)所需的生活條件比較簡(jiǎn)單，易于控制和掌握，而且動(dòng)物來(lái)源豐富，因此在生理實(shí)驗中常用蛙類(lèi)的坐骨神經(jīng)—腓腸肌標本和坐骨神經(jīng)標本來(lái)觀(guān)察組織的興奮性、刺激與反應的規律以及骨骼肌收縮的特點(diǎn)等。肌肉受到一次閾上刺激而產(chǎn)生的一次收縮為單收縮，其過(guò)程可分為三個(gè)時(shí)相，即潛伏期、縮短期和舒張期。肌肉受到連續的閾上刺激時(shí)，如果刺激間隔小于單收縮的過(guò)程，相鄰兩單收縮的時(shí)相會(huì )出現融合，表現為強直收縮現象。如果表現為每次收縮的開(kāi)始發(fā)生在上次收縮的縮短期，稱(chēng)完全強直收縮，如果表現為每次收縮的開(kāi)始發(fā)生在上次收縮的舒張期，稱(chēng)不完全強直收縮。使用生物信號采集處理系統，可以觀(guān)察到腓腸肌收縮的情況。

　　三、實(shí)驗材料

　　實(shí)驗動(dòng)物：健康青蛙一只；

　　實(shí)驗器材和藥品：蛙類(lèi)手術(shù)器械一套（粗剪刀一把，組織剪一把，眼科剪一把，鑷子一把，探針一根、玻璃分針2把，蛙釘4個(gè)、培養皿一個(gè)，蛙板一個(gè)、滴管一個(gè)、棉線(xiàn)若干），張力換能器，肌槽，刺激電極，鐵架臺，生物信號采集處理系統，微機，任氏劑。

　　四、實(shí)驗步驟

　　搗毀蟾蜍腦脊髓：取蟾蜍一只，用自來(lái)水沖洗干凈。左手握蛙，用食指下壓頭部前端，拇指按壓背部，使頭前俯。中指與無(wú)名指夾其前肢，無(wú)名指與小指夾其后肢，使整個(gè)軀干做最大屈曲。把探針自枕骨大孔處垂直刺入，到達椎管，即將探針改變方向刺入顱腔，向各側不斷攪動(dòng)，徹底搗毀腦組織；再將探針原路退出，刺向尾側，捻動(dòng)探針使其逐漸刺入整個(gè)椎管內，完全徹底搗毀脊髓。脊髓破壞完全的標志是：下頜呼吸運動(dòng)消失，反射消失，四肢松軟。

　　剪除軀干上部和內臟，去皮，制備下肢標本：用粗剪刀在骶髂關(guān)節前1厘米處剪斷脊柱，握住蟾蜍下肢，沿軀干兩側（避開(kāi)坐骨神經(jīng)）剪開(kāi)腹壁。此時(shí)軀干上部及內臟即全部下垂。剪除全部軀干及內臟組織。剪去肛周皮膚；用圓頭鑷子夾住脊柱，注意不要碰到坐骨神經(jīng)，捏住皮膚邊緣，逐步向下?tīng)坷瓌冸x皮膚。將全部皮膚剝除后，把標本置于盛有任氏液的培養皿中。

　　洗凈雙手和用過(guò)的全部手術(shù)器械。

　　分離兩下肢：避開(kāi)坐骨神經(jīng)，用粗剪刀從背側剪去骶骨，然后沿中線(xiàn)將脊柱剪成左右兩半，再從恥骨聯(lián)合中央剪開(kāi)，將已分離的標本浸入盛有任氏液的培養皿中。

　　取出一下肢，用蛙釘固定于蛙板上，固定時(shí)要注意，坐骨神經(jīng)和腓腸肌朝上。先用玻璃分針沿脊柱側游離坐骨神經(jīng)腹腔部，然后循股二頭肌和半膜肌之間的坐骨神經(jīng)溝，縱向分離暴露坐骨神經(jīng)之大腿部分直至腘窩，在分離過(guò)程中，把神經(jīng)周?chē)�的結締組織去除干凈，并把神經(jīng)的細小分支剪斷，但要注意不要用金屬器械碰觸神經(jīng)，也不要對神經(jīng)過(guò)度牽拉。實(shí)驗期間應不斷滴加任氏液使神經(jīng)保持濕潤。

　　用玻璃分針游離腓腸肌，并在下面穿線(xiàn)，在跟腱處打結。在結扎線(xiàn)的下方剪斷跟腱，在膝關(guān)節處把除腓腸肌外的小腿其他部分剪除。注意保持完整的腓腸肌。

　　用棉線(xiàn)在靠近脊柱的位置結扎坐骨神經(jīng)，并在結扎線(xiàn)的上方剪斷神經(jīng)，用眼科剪剪斷坐骨神經(jīng)的全部分

　　支。從腘窩處開(kāi)始剪掉大腿所有的肉，盡量把股骨刮干凈，在膝關(guān)節上至少1cm處剪去上段股骨。將標本浸入任氏劑的培養皿中。

　　實(shí)驗裝置與儀器連接：1、將標本股骨殘端固定在肌槽上的小孔內；2、將結扎腓腸肌肌腱的棉線(xiàn)與張力換能器連接，調節棉線(xiàn)的松緊，要與桌面垂直；3、將神經(jīng)置于肌槽的刺激電極上，用任氏劑保持標本濕潤；4、刺激電極插入微機上的刺激輸入孔；5、張力換能器與微機相應通道相連。

　　打開(kāi)電腦，進(jìn)入生物信號采集處理系統，在菜單欄選擇“實(shí)驗項目”》“神經(jīng)肌肉”》“刺激強度與反應的關(guān)系實(shí)驗模塊”點(diǎn)擊開(kāi)始，調節刺激參數，使頻率自動(dòng)逐漸遞增，串間隔為2、連續記錄不同頻率時(shí)的肌肉收縮曲線(xiàn)。

　　五、結果與分析

　　不同頻率刺激對肌肉收縮的影響：串間隔為2,頻率增量為1時(shí)的張力變化（如圖）可見(jiàn)單收縮、不完全強直收縮、完全強直收縮。

　　分析：刺激強度到達閾刺激時(shí)腓腸肌開(kāi)始收縮，在最大刺激收縮力前隨刺激強度增大而增大，到達最大刺激強度后，收縮力不發(fā)生明顯改變；在最大刺激強度條件下，某較小頻率使腓腸肌發(fā)生單收縮(如圖中第一次刺激)，頻率增大到，單收縮變?yōu)椴煌耆珡娭笔湛s（如圖中第26次刺激），頻率繼續增大，不完全強直收縮變?yōu)橥耆珡娭剖湛s（如圖中第7、8次刺激）。不同的腓腸肌其閾刺激，最大刺激均存在差異；其單收縮，不完全強直收縮和完全強直收縮所要頻率也不盡相同。

　　六、實(shí)驗總結

　　本次試驗嚴格按照操作步驟進(jìn)行，所得實(shí)驗結果較為理想，很容易觀(guān)察到腓腸肌的單收縮、不完全強直收縮、完全強直收縮現象。在實(shí)驗的過(guò)程中，制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標本是最繁瑣的步驟，也是實(shí)驗成功的關(guān)鍵所在，期間，我們進(jìn)行的比較緩慢，生怕弄錯了哪一步，一步步想原理、回憶老師是怎么說(shuō)的，所幸的是我們最終成功了，得到了較好的結果，在這次的不斷嘗試和思考中，很好地鍛煉了我們的動(dòng)手能力和思維能力。

　　離體蛙心灌流

　　一、【目的要求】

　　1、學(xué)習斯氏離體蛙心灌流法;

　　2、了解心肌的生理特性;

　　3、觀(guān)察Na+,K+,Ca2+及腎上腺素(Adr),乙酰膽堿(ACh)等對離體心臟活動(dòng)的影響。

　　二、【原理】

　　將離體蛙心（失去神經(jīng)支配的蛙心）保持在適宜的環(huán)境中，在一定的時(shí)間內仍然能夠保持節律性收縮，心臟正常的節律性活動(dòng)需要一個(gè)適宜的理化環(huán)境，離體心臟也是如此，離體心臟脫離了機體的神經(jīng)支配和全身體液因素的直接影響，可以通過(guò)改變灌流液的某些成分，觀(guān)察其對心臟活動(dòng)的作用。心肌細胞的自律性、興奮性、傳導性及收縮性，都與鈉、鉀及鈣等離子有關(guān)。血鉀濃度過(guò)高時(shí)（高于7.9mmol/L），心臟興奮性、自律性、傳導性及收縮性都下降，表現為收縮力減弱、心動(dòng)過(guò)緩和傳導阻滯，嚴重時(shí)心臟可停搏于舒張期。血鈣濃度升高時(shí)，心臟收縮力增強，過(guò)高可使心室停搏于收縮期。血鈣濃度降低，心肌收縮力減弱。血中鈉離子濃度的輕微變化，對心肌影響不明顯，只有發(fā)生明顯變化時(shí)，才會(huì )影響心肌的生理特性。腎上腺素可使心率加快、傳導加快及心肌收縮力增強，乙酰膽堿則與腎上腺素的作用相反。

　　三、【實(shí)驗儀器】

　　青蛙、常用手術(shù)器械、蛙板(或蠟盤(pán))、蛙心夾、計算機采集系統、張力傳感器、支架、雙凹夾、雙針形露絲刺激電極、滴管、培養皿(或小燒杯)、紗布、棉線(xiàn)、橡皮泥、任氏液。蛙心套管(斯氏套管或八木氏套管)、套管夾、0.65％NaCl、5％NaCI.2％CaCl2.1％KCl.1：5 000腎上腺素、1：10 000乙酰肌堿、300U／mL肝素。

　　四、【方法與步驟】

　　1、斯氏蛙心插管法

　�。�1）一只青蛙，雙毀髓后背位置于蠟盤(pán)中，按前面的方法暴露心臟。仔細識別心臟周?chē)�的大血�?見(jiàn)右圖)。在左主動(dòng)脈下方穿一線(xiàn)，于動(dòng)脈圓錐處結扎(動(dòng)物個(gè)體小時(shí)，結扎位置可靠上些)。再從左右兩主動(dòng)脈下方穿一線(xiàn)，并打一活結備用。左手提起主動(dòng)脈上的結扎線(xiàn)，右手用眼科剪在結扎線(xiàn)下方、沿向心方向將動(dòng)脈上壁剪一斜口。選擇大小適宜的蛙心套管，然后將盛有少量(套管內2～3 cm高度)任氏液(內加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管，山開(kāi)口處插入動(dòng)脈圓錐(見(jiàn)右圖)。當套管尖端到達動(dòng)脈圓錐基部時(shí)，應將套管稍稍后退，使尖端向動(dòng)脈圓錐的背部后下方及心尖方向推進(jìn)，經(jīng)主動(dòng)脈瓣插入心室腔內(于心室收縮時(shí)插入，但不可插得過(guò)深，以免心室壁堵住套管下口)。此時(shí)可見(jiàn)套管中血液沖人套管，并使液面隨心臟搏動(dòng)而亡下移動(dòng)，表明操作成功(否則需退回并重新插入)。用滴管吸去套管中的血液，更換新鮮任氏液。穩定住套管后，輕輕提起備用線(xiàn)，將左、右主動(dòng)脈連同插入的套管用雙結扎緊(不得漏液)，再將結線(xiàn)固定在套管的小玻璃鉤上，然后剪斷結扎線(xiàn)上方的血管。輕輕提起套管和心臟，看清靜脈竇的位置，于靜脈竇下方剪斷有牽連的組織，僅保留靜脈竇與心臟的聯(lián)系，使心臟離體(切勿損傷靜脈竇)。用任氏液反復沖洗心室內余血，使套管內灌流液不再有殘留血液。保持套管內液面高度一致(1.5～2 cm)，即可進(jìn)行實(shí)驗。

　�。�2）將插好離體心臟的套管固定在支架上，用蛙心夾夾住少許心尖部肌肉(不可夾得過(guò)多，以免因夾破心室而漏液)。再將蛙心夾上的系線(xiàn)繞過(guò)一個(gè)滑輪與張力傳感器相連（如右圖）。注意：勿使灌流液滴到傳感器上。調節顯示器上心臟收縮曲線(xiàn)的幅度適中。

　　2、實(shí)驗觀(guān)察

　　(1)記錄正常心搏曲線(xiàn)

　　(2)改用0、65％NaCI溶液灌流，并作好加藥標記，觀(guān)察心搏變化。待曲線(xiàn)氏插管裝置出現明顯變化時(shí)，立即吸去套管中的灌流液，同時(shí)做好沖洗標記，并用新鮮任氏液清洗2—3次，待心搏恢復正常。注意：換液時(shí)切勿碰套管，以免影響描記曲線(xiàn)的基線(xiàn)，同時(shí)保持灌流液面一致(以下同)。觀(guān)察可得，NaCI溶液會(huì )阻遏心臟搏動(dòng)。

　　(3)迅速用新鮮任氏液清洗2～3次，待心搏恢復正常。向套管內加入1～3滴2％CaCI：溶液，觀(guān)察并記錄心搏曲線(xiàn)的變化。當出現明顯變化時(shí)，立即更換任氏液，待心搏恢復正常(如果恢復遲緩，可多次沖洗)。

　　(4)同法向套管中加1—2滴1％KCl溶液，記錄心搏曲線(xiàn)的變化。當心搏曲線(xiàn)變化時(shí)，同法更換灌流液，待心搏恢復正常。

　　(5)同法記錄套管中加入l～2滴的腎上腺素溶液(1：10 000)后心搏曲線(xiàn)的變化。

　　(6)同法記錄套管中加入1—2滴乙酰膽堿溶液(1：10 000)后心搏曲線(xiàn)的變化。

　　五、【實(shí)驗結果與原因分析】

　　曲線(xiàn)的幅度————收縮的程度

　　曲線(xiàn)的密度————心率

　　曲線(xiàn)的基線(xiàn)————舒張的程度

　　1、正常收縮曲線(xiàn)圖

　　分析：

　　2、滴加含鈉離子溶液圖

　　分析：滴加Na離子溶液后，心跳減弱，這種現象出現的原因是由于灌注液中缺乏Ca2+，當Na＋明顯增高時(shí)，膜內外鈉離子的濃度梯度增大，因此，細胞Na離子內流加快，去極速

　　2＋度和幅度均增加，導致傳導性和自律性增高。同時(shí)，Na離子內流的增多促進(jìn)細胞內Ca的

　　2＋外運使細胞內Ca濃度降低，因此，心肌收縮能力減弱。

　　3、滴加2%CaCl溶液

　　分析：細胞外Ca2＋在細胞膜上對Na＋內流有競爭性抑制作用，稱(chēng)為膜屏障作用。[Ca2＋]增高時(shí)，Na＋內流受抑制，細胞0期除極速度與幅度減小，使興奮性及傳導性均降低。[Ca2＋]增高使Ca2＋內流增多，因此慢反應細胞0期去極化加快加強，傳導性增高，而快反應細胞平臺期縮短，有效不應期縮短，復極加速。Ca2＋內流增多，使心肌收縮能力增強。[Ca2＋]降低時(shí)，所引起的變化與高鈣時(shí)相反。因此加入CaCl2后，心率減少、振幅減少，基線(xiàn)上移。

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