催吐蘿芙木脂溶性生物堿提取工藝研究

催吐蘿芙木脂溶性生物堿提取工藝研究

　　1、材料

　　催吐蘿芙木干根（海南省五指山市海南制藥廠(chǎng)提供）。冰醋酸、醋酸酐、高氯酸、硫酸銀、氯化鋇、雷氏銨鹽等均為分析純，95%的酒精為工業(yè)級。

　　BT244S型電子天平（德國Sartorius）；RE-52-CS型旋轉蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠(chǎng)）；DZF-6020型真空干燥箱（上海博迅實(shí)業(yè)有限公司）。

　　2、方法與結果

　　2.1 蘿芙木生物堿的提取催吐蘿芙木干根經(jīng)粉碎，過(guò)40目篩后真空干燥�？紤]到不破壞蘿芙木提取物的生物活性，本實(shí)驗在溫水浴條件下采用工業(yè)酒精浸漬法。提取液經(jīng)減壓濃縮，回收乙醇得浸膏。

　　2.2 水溶性生物堿含量的測定雷氏銨鹽在酸性介質(zhì)中可與大部分的生物堿生成沉淀。因此本試驗將提取物用稀酸水溶解并調pH=2，加入新鮮配制的雷氏銨鹽飽和水溶液，濾出生成的生物堿雷氏鹽沉淀，用少量冰水洗滌1～2次，抽干。將沉淀溶于丙酮，濾除不溶物，再向生物堿雷氏鹽丙酮溶液中加入硫酸銀飽和水溶液，使生物堿雷氏鹽分解，生成生物堿硫酸鹽和雷氏銀鹽沉淀，過(guò)濾后再向濾液中加入計算量的氯化鋇溶液，生成生物堿鹽酸鹽和硫酸鋇沉淀，過(guò)濾，濾液蒸干得生物堿鹽酸鹽，稱(chēng)重。蘿芙木生物堿的藥用形式多為水溶性鹽［7］，因此本實(shí)驗以沉淀法得到的鹽酸鹽的量作為提取物中水溶性生物堿的量。

　　2.3 統計分析采用SAS（STATISTICAL ANALYSIS SYSTEM）8.0統計軟件進(jìn)行數據處理，以GLM過(guò)程做總模型方差分析，從而選擇較優(yōu)提取條件。

　　2.4 提取條件的優(yōu)選 稱(chēng)取催吐蘿芙木粗粉20 g，根據影響溶劑提取的主要因素，選擇溶劑用量（A）、提取時(shí)間（B）、提取溶液的pH條件（D）作為考察因素，每個(gè)因素根據實(shí)際情況取3個(gè)水平，按L9（34）表進(jìn)行正交實(shí)驗，分別按“2.1項”下所述方法制得浸膏。以提取物中的生物堿鹽酸鹽為指標，采用SAS 8.0統計軟件進(jìn)行統計分析。正交實(shí)驗表頭設計見(jiàn)表1，實(shí)驗結果及處理數據見(jiàn)表2～3。

　　正交實(shí)驗結果經(jīng)方差分析，各提取因素對提取效果均有顯著(zhù)影響，其中pH條件影響較顯著(zhù)，提取時(shí)間和溶劑用量次之。分別對各因素不同水平做差異顯著(zhù)性分析，可知A2與A3，C2與C3皆無(wú)顯著(zhù)性差異，其余兩兩之間差異顯著(zhù)。根據正交實(shí)驗結果，結合大生產(chǎn)可能性，并從降低成本角度考慮，最終確定提取工藝為A2B1D1，即藥材粉碎成細粉，加10倍量95%的工業(yè)酒精在pH為2的條件下，浸提5 h。經(jīng)過(guò)濾，濃縮，回收乙醇，制得浸膏。

　　2.5 最佳工藝條件的驗證以正交實(shí)驗的最佳工藝參數進(jìn)行驗證試驗，結果如表4�？芍�，應用優(yōu)化后的工藝進(jìn)行提取試驗，每100 g生藥提取后能制得12.8 g水溶性生物堿鹽酸鹽。3次所得提取物中生物堿鹽酸鹽的量基本平行，說(shuō)明此工藝條件重復性好。傳統的醇提工藝大多直接以工業(yè)酒精浸漬3～7 d，優(yōu)化后的提取工藝只需5 h，生物堿鹽酸鹽的提取率可達12.8%。

　　3、結果

　　催吐蘿芙木中的脂溶性生物堿進(jìn)行了大量研究，發(fā)現了一系列的單萜吲哚類(lèi)生物堿［2～5］。催吐蘿芙木原產(chǎn)于西非加納，是蘿芙木中的優(yōu)良品種，其干燥根及莖是我國重要的南藥，具有清風(fēng)熱、降肝火、消腫解毒的作用，是降壓藥利血平的主要天然來(lái)源［6］。正交實(shí)驗結果表明，提取溶劑的pH條件對提取水溶性生物堿影響最大，提取時(shí)間次之，溶劑用量影響最小。在A(yíng)3B1D1條件下，溶劑用量稍大，成本過(guò)高，故選擇A2B1D1為最佳提取工藝條件。

　　本實(shí)驗旨在優(yōu)化水溶性生物堿的提取工藝，首次采用雷氏銨鹽沉淀法從催吐蘿芙木浸膏中獲得生物堿鹽酸鹽。由于蘿芙木生物堿的藥用形式多為水溶性鹽，因此以沉淀法得到的鹽酸鹽作為考察指標，具有一定的現實(shí)意義。傳統的醇提工藝大多直接以工業(yè)酒精浸漬3～7 d，而在本工藝條件下，通過(guò)調節工業(yè)酒精的pH值，加入酸作為浸提輔助劑，提高了浸提效能，大大地縮短了浸提時(shí)間。