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畢業(yè)生疾控中心實(shí)習目的
一、實(shí)習目的
實(shí)習是學(xué)生大學(xué)學(xué)習很重要的實(shí)踐環(huán)節。實(shí)習是每一個(gè)大學(xué)生的必修課,它不僅讓我們學(xué)到很多在課堂上根本就學(xué)不到的知識,還能使我們開(kāi)闊視野,增長(cháng)見(jiàn)識,為我們以后更好把所學(xué)的知識運用到實(shí)際工作中打下堅實(shí)的基礎。
這次有機會(huì )能夠到疾控中心實(shí)習,我感到很慶幸。雖然只有兩周的時(shí)間,但是在幾位老師的幫助下,我對于微生物基礎知識有了更加深層次的理解,增加了對微生物知識的感性認識,鍛煉和提高了獨立分析和解決實(shí)際問(wèn)題的能力。與老師相處了兩周,老師很熱心和真誠,盡心盡力的將實(shí)驗操作的技能和要點(diǎn)傳授給我,為人很和善,包容我的錯誤,讓我有了很大的進(jìn)步。
二、實(shí)習內容
第一天在老師的帶我們去單位了解一下環(huán)境和認識一下老師。到達后李老師負責我們這次實(shí)習的全過(guò)程,她將實(shí)習過(guò)程的注意事項和規章制度,并且了解各個(gè)實(shí)驗室里面的大型儀器。
老師告誡我們到實(shí)習單位后一定要跟帶領(lǐng)我們的老師的作息時(shí)間一致,不可以早退,不能偷懶,一定要把實(shí)驗室的衛生搞好。我們即將進(jìn)入社會(huì ),在如何與人相處,處理好人際交往進(jìn)行鍛煉和提升,聽(tīng)到老師的一席話(huà),我受益匪淺,暗暗下決心,一定要好好的實(shí)習和學(xué)習,不給學(xué)校丟臉。
這次實(shí)習,由于老師們正在進(jìn)行的前期實(shí)驗都已完成,所以我們在這段時(shí)間主要進(jìn)行《食品安全國家標準----菌落總數測定》的培訓。
開(kāi)始時(shí)自己就是跟在實(shí)習老師的后面打打下手,幫忙拿溶劑,洗瓶子,稱(chēng)量等。在實(shí)習老師的指導帶領(lǐng)下,我對實(shí)驗室分析的內容慢慢的有了很深的了解,自己在一個(gè)多星期的學(xué)習下也能獨立完成一些簡(jiǎn)單實(shí)驗。
主要實(shí)驗是菌落總數的檢驗,程序如下:
樣品的稀釋
固體和半固體樣品:稱(chēng)取25 g樣品置盛有225 mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無(wú)菌均質(zhì)杯內,8000 r/min~10000 r/min均質(zhì)1 min~2 min,或放入盛有225 mL稀釋液的無(wú)菌均質(zhì)袋中,用拍擊式均質(zhì)器拍打1 min~2 min,制成1:10的樣品勻液。
液體樣品:以無(wú)菌吸管吸取25 mL樣品置盛有225 mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無(wú)菌錐形瓶(瓶?jì)阮A置適當數量的無(wú)菌玻璃珠)中,充分混勻,制成1:10的樣品勻液。
用1 mL無(wú)菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1 mL,沿管壁緩慢注于盛有9 mL稀釋液的無(wú)菌試管中(注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面),振搖試管或換用1支無(wú)菌吸管反復吹打使其混合均勻,制成1:100的樣品勻液。
按1.3操作程序,制備10倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次,換用1次1 mL無(wú)菌吸管或吸頭。
根據對樣品污染狀況的估計,選擇2個(gè)~3個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液),在進(jìn)行10倍遞增稀釋時(shí),吸取1 mL樣品勻液于無(wú)菌平皿內,每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿。同時(shí),分別吸取1 mL空白稀釋液加入兩個(gè)無(wú)菌平皿內作空白對照。
及時(shí)將15 mL~20 mL冷卻至46 ℃的平板計數瓊脂培養基(可放置于46 ℃±1 ℃恒溫水浴箱中保溫)傾注平皿,并轉動(dòng)平皿使其混合均勻。
培養
待瓊脂凝固后,將平板翻轉,36 ℃±1 ℃培養48 h±2 h。水產(chǎn)品30 ℃±1 ℃培養72 h±3 h。6.2.2 如果樣品中可能含有在瓊脂培養基表面彌漫生長(cháng)的菌落時(shí),可在凝固后的瓊脂表面覆蓋一薄層瓊脂培養基(約4 mL),凝固后翻轉平板,按6.2.1條件進(jìn)行培養。
菌落計數
可用肉眼觀(guān)察,必要時(shí)用放大鏡或菌落計數器,記錄稀釋倍數和相應的菌落數量。菌落計數以菌落形成單位(colony-forming units,CFU)表示。
選取菌落數在30 CFU~300 CFU之間、無(wú)蔓延菌落生長(cháng)的平板計數菌落總數。低于30 CFU的平板記錄具體菌落數,大于300 CFU的可記錄為多不可計。每個(gè)稀釋度的菌落數應采用兩個(gè)平板的平均數。
其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長(cháng)時(shí),則不宜采用,而應以無(wú)片狀菌落生長(cháng)的平板作為該稀釋度的菌落數;若片狀菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均勻,即可計算半個(gè)平板后乘以2,代表一個(gè)平板菌落數。
當平板上出現菌落間無(wú)明顯界線(xiàn)的鏈狀生長(cháng)時(shí),則將每條單鏈作為一個(gè)菌落計數。